雙特異性嵌合TCR-T細(xì)胞治療：攻克癌癥異質(zhì)性的下一代免疫療法

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引言

在癌癥治療的革命性突破中，T細(xì)胞療法以其精擊殺腫瘤細(xì)胞的特性占據(jù)核心地位。從CAR-T到TCR-T，再到雙特異性CAR-T，科學(xué)家始終在探索更強(qiáng)大的武器。如今，雙特異性嵌合T細(xì)胞受體（Bi-ChTCR）細(xì)胞治療 的出現(xiàn)，正將這一領(lǐng)域推向新高度。

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一、TCR-T療法的獨(dú)特機(jī)制

TCR分子屬于免疫球蛋白的一個(gè)超家族，由兩個(gè)共價(jià)結(jié)合的多態(tài)性亞單位組成，每個(gè)亞單位都是抗原特異性的，它們至少與四種不同類型的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)鏈有關(guān)。為了激活T細(xì)胞，TCR和主要組織相容性復(fù)合體（MHC）之間必須存在相互作用。

TCRs與pMHC（peptide-MHC）相互作用的強(qiáng)弱決定了未成熟胸腺細(xì)胞的命運(yùn)，對(duì)幼稚T細(xì)胞的存活至關(guān)重要。因此，TCR-T免疫治療技術(shù)通過與MHC特別是Ⅱ類分子的有效相互作用激活宿主的免疫系統(tǒng)，后者被TCR-T細(xì)胞和CAR-T細(xì)胞特異識(shí)別。TCR-T細(xì)胞可以識(shí)別細(xì)胞內(nèi)的腫瘤特異性抗原，而CAR-T細(xì)胞主要識(shí)別腫瘤表面的特異性抗原。此外，TCR-T保留了T細(xì)胞天然的活化路徑，即使低濃度抗原也能觸發(fā)高效殺傷，且免疫記憶功能更強(qiáng)。這使得TCR-T細(xì)胞在腫瘤治療中更有效。

目前，一些新的技術(shù)和工具正在應(yīng)用于TCR-T，有助于提高TCR-T治療的療效和安全性，TCR-T細(xì)胞治療正展現(xiàn)出抗腫瘤治療的巨大潛力。

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二、CAR-T與TCR-T的比較

在ACT療法中、TCR-T和CAR-T細(xì)胞都已被成功地用于實(shí)體瘤的臨床治療。

CAR包含腫瘤抗原靶向的單鏈抗體、跨膜結(jié)構(gòu)域和CD3ζ的胞內(nèi)激活結(jié)構(gòu)域。通過這種方式，工程化的CAR能夠識(shí)別特定的腫瘤相關(guān)抗原，CAR能夠在不經(jīng)過MHC處理的情況下結(jié)合未經(jīng)處理的腫瘤表面抗原。

第一代CAR-T細(xì)胞表現(xiàn)出有限的擴(kuò)增和相對(duì)較短的持久性， “第二代”CAR-T加入了共刺激受體CD28、4-1BB/CD137和OX40。將這些共刺激受體添加到CAR-T細(xì)胞的CD3ζ結(jié)構(gòu)域中，從而促進(jìn)更強(qiáng)大和持久的T細(xì)胞反應(yīng)。第三代CARs同時(shí)結(jié)合兩個(gè)共刺激信號(hào)（CD28和4-1BB），這比第二代CARs具有更好的擴(kuò)增和更長(zhǎng)的持續(xù)性。

相反，TCR是與MHC抗原復(fù)合物結(jié)合的α/β異二聚體。與TCR相比，CARs識(shí)別腫瘤抗原具有某些缺點(diǎn)，如腫瘤外毒性。與CARs相比，TCRs在基于T細(xì)胞的治療中具有一些結(jié)構(gòu)性優(yōu)勢(shì)，例如其受體結(jié)構(gòu)中有更多的亞單位（10：1），免疫受體基于酪氨酸的激活基序（ITAMs）更多（10：3），對(duì)抗原的依賴性更?。?：100），以及更多的共刺激受體（CD3，CD4，CD28等等）。具有低MHC親和力范圍（104-106M-1）的TCR就可以有效的激活T細(xì)胞，相反，CARs需要更高的親和力范圍（106-109M-1）。

因此，CAR介導(dǎo)的細(xì)胞毒性依賴于更高密度的細(xì)胞表面抗原。此外，T細(xì)胞/抗原相互作用在免疫突觸（IS）結(jié)構(gòu)中啟動(dòng)，其中TCR呈現(xiàn)具有外周LFA-1粘附的環(huán)狀區(qū)域，而CAR呈現(xiàn)無(wú)環(huán)狀區(qū)域的彌散LFA-1分布。因此，TCR-IS比CAR-IS發(fā)出的信令速度慢但持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。同時(shí)，CAR-T細(xì)胞呈現(xiàn)出更快的殺傷功能，并向下一個(gè)腫瘤靶點(diǎn)遷移（連環(huán)殺傷），這與TCR-T細(xì)胞延長(zhǎng)信號(hào)傳導(dǎo)和延長(zhǎng)殺傷時(shí)間形成鮮明對(duì)比。

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三、雙靶點(diǎn)CAR-T的療效和安全性

與單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療相比，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的優(yōu)勢(shì)在于其能夠減少腫瘤細(xì)胞的抗原逃逸。單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的臨床研究已經(jīng)顯示超過90%的完全響應(yīng)（CR），在雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的初始反應(yīng)方面幾乎沒有改善的空間。因此，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的期望不僅是提高反應(yīng)的持久性，而且是在使用單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療后復(fù)發(fā)或難治的患者中重新產(chǎn)生響應(yīng)。在少數(shù)研究中，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞療法似乎已證明DOR和OS優(yōu)于單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞。例如，接受CD19單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的患者的OS與接受CD22單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的患者接近，但比接受CD19/CD22雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的患者的OS短。在非霍奇金淋巴瘤中，CD19/CD20雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的PFS和OS的百分比高于CD19單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞。CD19/CD20或CD19/CD22的雙靶點(diǎn)CAR-T的設(shè)計(jì)策略基于這樣的假設(shè)，即靶向CD20或CD22將有利于減少CD19的抗原逃逸。已披露的數(shù)據(jù)表明，靶向CD22或CD20的單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療或雙靶向CAR-T細(xì)胞治療可以使CD19逃逸的患者獲得CR。特別是，七名先前接受過CD19單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的患者，其中五名患者在接受雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療后獲得CR。因此，臨床數(shù)據(jù)支持CD19/CD20或CD19/CD22雙靶向CAR-T細(xì)胞治療用于對(duì)CD19-CAR-T細(xì)胞治療耐藥的復(fù)發(fā)患者。另外，在多發(fā)性骨髓瘤中，BCMA-CAR和第二個(gè)CAR的組合仍在探索。BCMA/CD19和BCMA/CD38的雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞療法已進(jìn)入臨床，而BCMA/CS1（SLAMF7）和BCMA/GPRC5D雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞療法即將進(jìn)入臨床。BCMA/CD19雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療在一小部分患者中顯示出令人振奮的療效，五名患者的ORR，只有一個(gè)3級(jí)的細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）發(fā)生，沒有神經(jīng)毒性（NT）發(fā)生。此外，BCMA/CD38雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞也顯示出良好的效果。在使用BCMA/CD38雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療后，8例sCR患者中有5例在中位隨訪9個(gè)月時(shí)仍保持sCR，9個(gè)月的PFS為75%。在安全性方面，已有的數(shù)據(jù)表明，在單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞和雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療之間，1-2級(jí)CRS的發(fā)生率相似。在可用的已報(bào)告的研究中，單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療的九個(gè)臨床試驗(yàn)中有兩個(gè)（22.2%）沒有報(bào)告3-4級(jí)CRS，而雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞在八個(gè)臨床試驗(yàn)中有三個(gè)（37.5%）沒有報(bào)告3-4級(jí)CRS。另外，42.9%（3/7）的單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞臨床試驗(yàn)未報(bào)告3-4級(jí)NT，而雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞則有50%（4/8）未報(bào)告3-4級(jí)NT。

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雙特異性嵌合TCR-T

針對(duì)傳統(tǒng)療法的短板，科學(xué)家們提出的Bi-ChTCR技術(shù)，在已有的TCR-T和CAR-T技術(shù)上帶來(lái)了突破和創(chuàng)新：

首先，Bi-ChTCR將兩種抗體的靶向域分別融合于TCRα/β鏈，保留天然CD3復(fù)合體共刺激架構(gòu)；這種設(shè)計(jì)允許Bi-ChTCR與整個(gè)TCR信號(hào)復(fù)合物結(jié)合，并以HLA非依賴性的方式提供對(duì)兩種抗原的敏感識(shí)別。

其次，Bi-ChTCRs成功地重建了天然TCR結(jié)構(gòu)，在抗原識(shí)別后形成了經(jīng)典的免疫突觸，并觸發(fā)了關(guān)鍵信號(hào)中間體的TCR樣磷酸化。天然TCR的抗原敏感性（10–10 M1）結(jié)合工程化雙靶點(diǎn)，使Bi-ChTCR T細(xì)胞的抗原敏感性優(yōu)于表達(dá)常規(guī)單特異性和雙特異性CAR的CAR-T細(xì)胞。此外，Bi-ChTCR T細(xì)胞保留TCR天然信號(hào)傳導(dǎo)模塊，活化持續(xù)時(shí)間比CAR-T細(xì)胞延長(zhǎng)。

臨床前數(shù)據(jù)顯示，在Nalm-6淋巴瘤模型中，混合CD19+/CD22+、CD19?/CD22+、CD19+/CD22?三種腫瘤細(xì)胞后，Bi-ChTCR T細(xì)胞較傳統(tǒng)雙靶CAR-T（如Loop CAR）顯示出更高的腫瘤清除率和生存率（P

此外，對(duì)于CD19或CD22低表達(dá)的腫瘤，Bi-ChTCR仍誘導(dǎo)IL-2分泌（濃度達(dá)CAR-T的5倍）并介導(dǎo)有效殺傷，而相同條件下CAR-T細(xì)胞幾乎無(wú)反應(yīng)。 另一方面，Bi-ChTCR T細(xì)胞在無(wú)抗原刺激時(shí)基底信號(hào)活性極低，減少T細(xì)胞耗竭；而雙靶CAR-T因常伴有“持續(xù)性信號(hào)噪音”，易導(dǎo)致功能性耗損。

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結(jié)語(yǔ)

從單靶點(diǎn)突破到雙特異性進(jìn)化，Bi-ChTCR的誕生標(biāo)志著免疫治療進(jìn)入“雙引擎驅(qū)動(dòng)”時(shí)代。它不僅解決了腫瘤異質(zhì)性和抗原逃逸的臨床痛點(diǎn)，更通過天然TCR信號(hào)架構(gòu)重塑了T細(xì)胞活性調(diào)控的底層邏輯。隨著后續(xù)臨床試驗(yàn)的推進(jìn)，這項(xiàng)技術(shù)有望為血液腫瘤和實(shí)體瘤患者提供安全、持久且廣譜的治療選擇。