微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究

　     新生兒在妊娠或分娩過程中可能存在被動性母源性的IgG抗體輸人，若被動輸人的Ig“抗體為針對新生兒或胎兒的溶血性抗體時.可導(dǎo)致新生兒及胎兒溶血病(hemolyticdiseasesofnewborn,HD)的出現(xiàn)。另一方面，新生兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟.體內(nèi)一般無自身對一應(yīng)的抗一}1或抗一1存在，故血型鑒定時可不需要考慮反定型結(jié)果:而其紅細(xì)胞表面的血型抗原也比成人表達(dá)強(qiáng)度低，因此針對新生比的血型鑒定與輸血策略應(yīng)區(qū)別于成人一「一，如診斷為新生兒溶血病時，將不宜再選擇與患兒血型同型而應(yīng)采用相容性的輸血或換血原則1一盡管當(dāng)前國際輸血指南1一般都以斗個月將嬰兒劃分成2種不同的輸血策略，但日前國內(nèi)的臨床輸血技術(shù)規(guī)范尚無明確提出許多臨床醫(yī)生尤其是非血液科或新生兒科醫(yī)生有時對伴隨貧血的新生兒提出申清輸血時仍舊依賴同型輸血原則及相應(yīng)的輸血前檢驗(yàn)，而并非首先考慮鑒別新生兒溶血病存在與否，丙實(shí)施相應(yīng)的同型輸血或者是相容h}輸血策略實(shí)際上新生幾選擇同}i}}l血尤其是沐()型血液時輸注時輸血前檢驗(yàn)要求能篩查新生兒血清或血漿中是否存在被動獲得的母源性抗r}或是抗B，但這種篩查溶血性抗A或抗B主要見于交叉配血其準(zhǔn)確性必將受到不同配血方法靈敏度的影響，因此輸血前檢驗(yàn)尤其是交又配血H}}一有必要評估井選擇適宜新生兒群體的檢驗(yàn)方法，以保障輸血安全。筆者通過收集ABC>-HD\診斷陽性的新生兒相關(guān)資料._井選擇與.AY()同型血通過國內(nèi)常用的凝聚胺介質(zhì)技術(shù)及微柱凝膠技術(shù)Cmicroco上umngeltechnique,MCCzT。進(jìn)行交叉配血對比分析，以確定適宜新生兒的輸血前檢驗(yàn)方法及輸血策略。 　　

　     1對象與方法 　　

　     1.1對象
　　選擇我院2011-11-2012-O,p通過新生兒溶血病3項(xiàng)試驗(yàn)診斷為的患兒共20例.男女各1。例:年齡1一3。 　　

　     1.2方法
　　收集所有患兒的基本資料及3項(xiàng)診斷試驗(yàn)資料;隨機(jī)取5份:=}B(同型紅_細(xì)胞制劑的血樣與患兒的血清及紅細(xì)胞放散液分別進(jìn)行主側(cè)交又配血.
　　所有血液制劑的血樣選取標(biāo)f血型復(fù)查正反定一致.正定凝集強(qiáng)度不低于J一，反定凝集強(qiáng)度不低于2一I。交叉配血方法同時選擇凝聚胺介質(zhì)(珠海ba}<)有限公司)及微柱凝膠法(美國Biorad公司hiamedlisscomb、抗人球蛋白卡。.操作均按相應(yīng)試劑的說明一朽進(jìn)行。 　　

　     1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 　　

　     相應(yīng)的四格表汁數(shù)資料采用I'earson卡方檢驗(yàn)或Fi-sher精確檢驗(yàn):交叉配血方法所得結(jié)果的比對分析采用Ka)pa一致性檢驗(yàn),Kappa系數(shù)的大小代表一致性的強(qiáng)弱程度。 　　

　     2結(jié)果
　　20例ABO-HDV患者的3項(xiàng)試驗(yàn)診斷模式及其采用!VIGT及凝聚胺2種方法進(jìn)行的主側(cè)游離血清及放散液共100次的配血結(jié)果見表I。本次研究的患兒血型及性別分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 　　

　     從表1可知.在Ioo次交叉配血中.微柱凝膠技術(shù)中血清及放散液出現(xiàn)不合大7次及62次.凝聚胺技術(shù)中血清及放散液出現(xiàn)不合為3次及呂次，而聯(lián)合所有血清及放散液出現(xiàn)不合iJ次:所有血清及放散液交叉配血結(jié)果中，米出現(xiàn)1例配血模式為凝聚胺陽性而微利一凝膠技術(shù)陰性。直抗類型與交叉配血結(jié)果的差異，汗見表0。從表2司一知，除了使用凝聚胺技術(shù)對患兒血清進(jìn)行交叉配血外.汽抗陽性的患幾血清及放散液交叉配血不合率均高于直抗陰性患兒配血方法與患兒血清及放散液交叉配血結(jié)果的比較:‘D血清交叉配血比較見表3經(jīng)Kapx>:一致性檢驗(yàn).2種交叉配血方法結(jié)果一致性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.即2種交又配血_方法的配血結(jié)果不具有致性提示凝聚胺技術(shù)對患兒血清進(jìn)行交叉配血靈敏度較差。②紅細(xì)胞放散液交又配血比較見表斗經(jīng)Kappa一致性檢驗(yàn).2種交叉配血方法結(jié)果一致性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即2種交叉配血方法的配血結(jié)果不具有一致性.提示凝聚胺技術(shù)對患J[放散液進(jìn)行交叉配血靈敏度較差。 　　

　     3討論
　　新生兒溶血病患兒因?yàn)轶w內(nèi)存在被動輸入母源溶血性的Ig(l抗體這種濟(jì)血性的抗體可以存在于患幾游離血‘清中.亦可結(jié)合與患兒體內(nèi)紅細(xì)胞卜，因此。尋找這種致病性抗體即新生JL溶血病診斷試驗(yàn)包括:直接抗球蛋白試驗(yàn)、游離血清和抗休釋放實(shí)驗(yàn)?；純狠斞皺z驗(yàn)中的交又配血應(yīng)包括患兒游離血清及紅細(xì)胞放散液因?yàn)橛坞x血清進(jìn)行交又配血是反映游離在患兒血液中的溶血性抗體與輸注紅細(xì)胞之間的不相容性‘而放散液進(jìn)行交又能反映結(jié)合在細(xì)胞仁的濟(jì)血性抗體與輸注的紅細(xì)胞之間的不相容性。從表1中可知‘單獨(dú)通過血清的交叉配血可發(fā)現(xiàn)7-}的配f}l不合，IfT1DTI清聯(lián)合放散液可發(fā)現(xiàn)7<)的配血不合一這提示血清聯(lián)合放散液對:}F>()-HD\患兒的交叉配血仍有必要.兩者聯(lián)合可以進(jìn)一步提高交叉配皿的安全性另一方而.
　　

          患兒紅細(xì)胞血型抗原表達(dá)強(qiáng)度、被動輸人的溶血性抗體量和性質(zhì)均存在個體差異且患兒亦存在耳、同程度的清除代i}f變化，因而不同患兒交叉配血結(jié)果的準(zhǔn)確性將直接受到所使用配血方法靈敏度的干擾，盡管當(dāng)前的方案使用抗球蛋日技術(shù)〕一但國內(nèi)常用的凝聚胺介質(zhì)技術(shù)在新生兒交叉配血實(shí)際效果如何.尚存在爭議〔從本研究結(jié)果可知.在aY()-HI)\陽性新生口血清交又配血中使用微柱凝膠技術(shù)準(zhǔn)確率(%:1}0)明顯比使用凝聚胺技術(shù)準(zhǔn)確率(3%)高，在HDU陽性新生兒放散液交又配血中使用微柱凝膠技術(shù)的準(zhǔn)確率(620)亦明顯比使用凝聚胺技術(shù)的準(zhǔn)確率(二0o)高.而且在血清及放散液交叉配血中均未出現(xiàn)1例凝聚胺陽性而微柱凝膠技術(shù)陰性結(jié)果，這允分說明微柱凝膠技術(shù)靈敏度高于凝聚胺介質(zhì)技術(shù)，提示微柱凝膠技術(shù)更適宜存在特殊免疫血液學(xué)狀態(tài)的新生兒輸血前檢驗(yàn)。 　　

　     但值得注意的是.即使是采用的微柱凝膠技術(shù)，在100次交又配血中聯(lián)合血清及放散液交又配血仍有引次為陰性，這說明若針對潛在陽性的.患兒選擇了與患兒同型紅細(xì)胞制劑，將有.01只的可能性出現(xiàn)交義}血不合漏檢。因而，這需要引起臨床新生J[科一醫(yī)生和輸血實(shí)驗(yàn)室人員足夠的重視.不能育目依賴同型輸血原則，也不能以交叉結(jié)果陰性作為新生兒安令輸血的后一道試驗(yàn)關(guān)或金標(biāo)準(zhǔn)因此.筆者汰為適宜新生幾的輸血策略為:不論新月幾是否出現(xiàn)溶價(jià)_病可能性如出現(xiàn)進(jìn)行性黃疽或貧血癥狀時若需要進(jìn)行輸血治療時.好首光做II}>1i0項(xiàng)試驗(yàn)來篩查是否發(fā)生<<}I}(>-HITV并指導(dǎo)實(shí)施合理選擇同型或相容性輸血以保障新生兒的輸血安全;若沒有進(jìn)行}rI)--I}IJ篩查性診斷但考慮到,}}f>血型抗原強(qiáng)表達(dá)在成人紅細(xì)胞上吐在i個月內(nèi)的嬰兒仍可能存在母源性的抗ty及抗B從而引發(fā)潛在的i容血危險(xiǎn)二一，可()型洗滌紅細(xì)胞及氣B型血漿的相容性輸血至于出現(xiàn)Hrw診斷為陽性但游離血清或放散液交又妮血出現(xiàn)陰性可能的原因?yàn)?新生兒溶血病篩查試驗(yàn)中使用的酶處理細(xì)胞可增強(qiáng)吸收抗體的能力從而提高診斷的陽性率?；蛘呤墙徊媾溲褂玫某扇思t細(xì)胞與試劑細(xì)胞之間的差異.造成與弱溶血性抗體反應(yīng)出現(xiàn)配血結(jié)果的不一致本次研究由于末調(diào)查1}()-HDV陰性患兒反定Igi'VI抗八抗B的特點(diǎn).無法準(zhǔn)確評估血型鑒定中反定LJ結(jié)果且{〕溶血性或非濟(jì)血性抗體與HI發(fā)生率之間的關(guān)聯(lián).但考慮到新生兒尚不能產(chǎn)生自身的血型抗體·反定型出現(xiàn)的I};Ci或Ig1}'i抗a;抗侶均源自母體被動輸人.因而反定型結(jié)果理論J一可以反映母源性被動輸八的強(qiáng)度寶.當(dāng)然具體的相關(guān)性有待于進(jìn)一步研究本次研究AFt}-HD患兒的I)}T陽hF}率僅為1C)`}}'i8%`?0).但從表2可知，I>.}T陽性與h}T陰性的溶血病患幾其血清、放散液采用微柱凝膠技術(shù)以及放散液采用凝聚胺技術(shù)進(jìn)行交叉配血結(jié)果均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.即陽性的患兒采用同型血進(jìn)行交叉配血不合率高于})_}T陰性患!L，這提示我們在新生兒輸血前檢查中增加直接抗人球試驗(yàn)是必要的.有助于發(fā)現(xiàn)新生兒是否存在結(jié)合在細(xì)胞上的溶血性抗體。當(dāng)前很多生產(chǎn)微柱凝膠卡的公司如Biorad公司針對新生兒的血型鑒定卡中均設(shè)有DAT實(shí)驗(yàn)孔因此極大方便了檢測。 　　

　     總而言之，不論是臨床醫(yī)生還是輸血實(shí)驗(yàn)工作人員對待新生兒患者申請輸血時.應(yīng)充分考慮到其生理特點(diǎn)及免疫血液學(xué)特點(diǎn)，實(shí)施輸血前檢驗(yàn)的有關(guān)試驗(yàn)時增加直接抗球蛋自試驗(yàn)是卜分必要的.而目實(shí)施交叉配血時宜采用抗球蛋日介質(zhì)技術(shù)如微柱凝膠抗球蛋白技術(shù)能有效提高交叉配血的的安全性.同時應(yīng)滾避免在新生兒選擇血液時盲目遵照ABO同型輸血原則適宜的新生兒輸血策略應(yīng)為:條件許可時應(yīng)曲先進(jìn)行新生兒溶血病診斷來合理選擇同型或相容性輸血.或者O型洗滌紅細(xì)胞及AB型血漿的相容性輸血策略。 　　

　     參考文獻(xiàn) 　　

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