急性腦血管疾病并發(fā)癲癇血小板膜糖蛋白檢測(cè)的臨床分析

        急性腦血管血栓性疾病，比如：腦血栓形成、深靜脈血栓形成以及心肌梗死形成等疾病的發(fā)病率很高，是導(dǎo)致人類(lèi)致死的重要原因。血小板主要的功能就是參與血栓的形成，而此功能的實(shí)現(xiàn)是通過(guò)血小板表面的糖蛋白作用完成的。每個(gè)因子間互相作用，在靜息狀態(tài)下使血小板膜糖蛋白發(fā)生急劇的數(shù)量重排，構(gòu)型轉(zhuǎn)變。同血漿內(nèi)部有關(guān)物質(zhì)發(fā)生結(jié)合，導(dǎo)致血小板出現(xiàn)集聚現(xiàn)象[1]。同時(shí)，血小板內(nèi)部發(fā)生各種分泌的反應(yīng)，能促進(jìn)血栓形成。但是，糖蛋白多是CD42b、GPⅡb或GPⅢa以及CD62P等，糖蛋白表達(dá)數(shù)量的多少，可以對(duì)血小板功能狀態(tài)做出直接判斷。對(duì)于急性心血管疾病，增強(qiáng)血小板活化程度，參與疾病的產(chǎn)生、進(jìn)展，其中以血小板膜糖蛋白發(fā)生活化的程度明顯?，F(xiàn)分析本組120例急性心血管疾病患者檢測(cè)血小板膜糖蛋白的情況?，F(xiàn)報(bào)告如下。 
       1資料與方法 
       1.1一般資料：選取在我院治療急性腦血管疾病并發(fā)癲癇的120例患者，其中包括腦血栓、深靜脈血栓、心肌梗死各40例患者分別作為實(shí)驗(yàn)組的三個(gè)組別，與對(duì)照組同期40例健康體檢者進(jìn)行比較。實(shí)驗(yàn)組：男63例，女57例。年齡43～74歲，平均(58.98±6.46)歲。均符合全國(guó)腦血管疾病會(huì)議及心血管疾病會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組：男21歲，女19例。年齡41～71歲，平均(56.74±8.23)歲。本組患者一般基本資料相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。 
       1.2方法：血小板膜糖蛋白的檢測(cè)：選用美國(guó)BD公司研制的流式細(xì)胞儀對(duì)其檢測(cè)。選用大號(hào)針管準(zhǔn)備采血，將抽取的前2 ml血液棄掉。再采集2 ml血液，置于枸櫞酸鈉抗凝型真空采血管內(nèi)。在現(xiàn)有的配備Falcon管內(nèi)，管壁上不可以有血液殘留。在試驗(yàn)管內(nèi)，CD61 PerCP、CD62P PE以及PAC-1FITC三種熒光抗體各取20μl。對(duì)照管中置入CD61 PerCP、PAC-1 FITC以及IgG1 PE三種熒光抗體各取20μl，PAC-1加入10μl阻斷劑RGDS。同時(shí)輕輕搖勻，室溫下進(jìn)行避光反應(yīng)15～20 min[2]。每個(gè)管內(nèi)加入1%的多聚甲醛固定液相互混勻，在2～8℃的陰暗處?kù)o置30 min，24 h內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。將流式細(xì)胞儀側(cè)向角散射(即SSC)三色熒光和前向角散射(即FSC)的檢測(cè)信號(hào)都設(shè)置成對(duì)數(shù)放大，以CD61 PerCP/SSC的雙參數(shù)設(shè)門(mén)，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)管和對(duì)照管中血小板群的GPⅡb/Ⅲa、CD62P的陽(yáng)性血小板的百分?jǐn)?shù)。 
       1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS建立ROC曲線(xiàn)，陰陽(yáng)性界值進(jìn)行確定。采用χ2檢驗(yàn)，如果檢測(cè)值小于結(jié)點(diǎn)則為陽(yáng)性。 
       2結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組血小板膜糖蛋白中CD62P、GPⅡb/Ⅲa的陽(yáng)性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。 
       3討論

       血小板膜糖蛋白對(duì)血小板粘附在血管壁，相互聚集及血栓形成的過(guò)程中具有重要的作用[3]。每個(gè)因子間互相作用，在靜息狀態(tài)下，使血小板膜糖蛋白發(fā)生急劇的數(shù)量重排，構(gòu)型轉(zhuǎn)變。同血漿內(nèi)部有關(guān)物質(zhì)發(fā)生結(jié)合，導(dǎo)致血小板出現(xiàn)集聚現(xiàn)象。血小板膜表面存在的配體與受體間互相作用，對(duì)血小板粘附、聚集、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等起到調(diào)節(jié)性的作用。在急性心血管疾病中，血小板活化程度的提高及參與疾病的發(fā)生和發(fā)展，其中血小板膜糖蛋白活化發(fā)生明顯變化。而且血小板的活化表面膜蛋白的依賴(lài)性顆粒尤為突出，可作為血小板的釋放或活化反應(yīng)的特異性標(biāo)志物，也可作為機(jī)體內(nèi)部產(chǎn)生血栓的重要標(biāo)志。
       是機(jī)體定位診斷的向靶，而且還給導(dǎo)向血栓性疾病的治療提供了參考依據(jù)。急性心血管疾病、動(dòng)脈硬化的形成均與血小板膜糖蛋白有密切聯(lián)系，主要因動(dòng)脈硬化的形成導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損害，暴露出膠原，增進(jìn)血小板的粘附。并且腦血管內(nèi)部的脂質(zhì)斑塊導(dǎo)致局部血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生改變，產(chǎn)生高切變力，進(jìn)而激活血小板。
       同時(shí)，脂質(zhì)斑塊容易發(fā)生潰破，使血液內(nèi)脂質(zhì)發(fā)生暴露，終導(dǎo)致血小板活化[4]。血小板發(fā)生活化以后，質(zhì)膜上顆粒膜蛋白表達(dá)出較高水平，因此，GPⅡb或GPⅢa、CD62P發(fā)生顯著性改變。GPⅡb或GPⅢa分子即為纖維蛋白原的受體。在血小板發(fā)生活化時(shí)，GPⅡb或GPⅢa是由受體或配體產(chǎn)生非結(jié)合狀態(tài)的轉(zhuǎn)變，形成受體與配體相互結(jié)合的狀態(tài)，以便血小板膜、纖維蛋白以及血小板互相之間出現(xiàn)結(jié)合的狀態(tài)，引起血小板的聚集。在靜止的血小板內(nèi)，在α顆粒上CD62P呈選擇性分布。當(dāng)血小板發(fā)生活化以后，α顆?？梢匝杆俸脱“迥ち己孟嗳冢籴尫臶5]。 
       而在血小板表面CD62P可以進(jìn)行重新分布，由此可見(jiàn)，CD62P在血小板表面準(zhǔn)確表達(dá)能夠作為判斷血小板是否發(fā)生活化的特異性標(biāo)志物。本組研究采用流式細(xì)胞儀對(duì)急性腦血管疾病患者的血小板膜糖蛋白進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，血小板膜糖蛋白中GPⅡb/Ⅲa與CD62P的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明在急性腦血管發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中，血小板活化水平較對(duì)照組高，其作用機(jī)制是因?yàn)閯?dòng)脈粥樣斑塊的產(chǎn)生，從而促使血小板活化因素不可逆轉(zhuǎn)性，致使血小板長(zhǎng)期保持在活化狀態(tài)。在臨床抗凝治療時(shí)，一定程度地減小了血小板活化，但是不能將致活化因素消除，所以，還需長(zhǎng)期采用抗凝治療防治血栓的產(chǎn)生。血小板活化是腦血管內(nèi)血栓產(chǎn)生及梗死的早期因素，其CD62P、GPⅡb/Ⅲa活化標(biāo)志物的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)急性腦血管疾病發(fā)生的預(yù)防、診斷以及治療效果的監(jiān)測(cè)均具有重要價(jià)值。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)及熒光標(biāo)記活化的血小板單克隆抗體能直接敏感的表達(dá)病理狀態(tài)下，人體內(nèi)部血小板的活化程度，給臨床癥狀得以緩解后，再一步抗血小板治療提供了較為有力的理論依據(jù)。 
       4參考文獻(xiàn) 
       [1]朱曉鈺，劉長(zhǎng)劍，劉玉英，等.急性腦血栓形成患者血小板膜糖蛋白臨床研究[J].醫(yī)師進(jìn)修雜志，2010，9(23)：43.
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       [3]杜彥輝，趙秀欣，孫支堂，等.急性腦梗死患者血小板膜糖蛋白CD62P表達(dá)量的檢測(cè)及臨床意義[J].寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，6(25)：413.
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       [5]燕虹，陳昆明.腦梗死患者血小板膜糖蛋白CD62P和CD63的測(cè)定及意義[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，33(5)：413.