胰腺癌患者血清中糖類抗原199和基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)及意義

　作者：譚勁赟,孟蔚韋華　　作者單位：蘭州市第二人民醫(yī)院普外一科，甘肅 蘭州

　　【摘要】目的：分別檢測胰腺癌患者和正常對照組血清中糖類抗原199(CA199)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)水平，并分析其與胰腺癌臨床特征的相關(guān)性，以期為臨床工作提供理論支持。方法：選取我院收治的90例經(jīng)術(shù)后病理確診為胰腺癌的患者作為觀察組，90例健康成人血清作為正常對照組，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清中CA199和MMP-2的含量。結(jié)果：觀察組患者血清中CA199和MMP-2表達(dá)量顯著高于對照組，CA199和MMP-2的表達(dá)量與分化程度、神經(jīng)浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。經(jīng)相關(guān)分析，胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論：CA199和MMP-2在胰腺癌患者血清中高表達(dá)，二者可能在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用;早期聯(lián)合檢測CA199和MMP-2可能對判斷患者的預(yù)后及指導(dǎo)臨床治療有重要價值。
　　【關(guān)鍵詞】 胰腺癌;糖類抗原199;基質(zhì)金屬蛋白酶-2;診斷

　　[ABSTRACT] ob[x]jective： To study the ex[x]pressions of serum CA199 and MMP-2 in patients with pancreatic carcinoma， and to explore their relationship with clinical characteristics of the disease. Methods： The ex[x]pressions of serum CA199 and MMP-2 in 90 patients with pancreatic carcinoma and 90 healthy counterparts were detected and compared with enzyme-li[x]nked immunosorbent assay. Results： The ex[x]pressions of CA199 and MMP-2 were obviously higher in the patients with pancreatic carcinoma than that in healthy control group. The ex[x]pressions level of CA199 and MMP-2 were obviously correlated with differentiation degree， perineural invasion and me[x]tastasis status. For patients group， ex[x]pression of CA199 was positively correlated with MMP-2. Conclusions： High ex[x]pression levels of CA199 and MMP-2 may indicate their important roles in the occurrence of pancreatic carcinoma. Combined detection of CA199 and MMP-2 can help to predict prognosis and choose treatment for patients with pancreatic carcinoma.

　　[KEY WORDS] Pancreatic carcinoma; CA199; MMP-2; Diagnosis

　　胰腺癌是危害人類健康的重要疾病，血清中各種細(xì)胞因子對預(yù)后及治療的指導(dǎo)作用逐漸引起人們的關(guān)注[1]。糖類抗原199(CA199)是由單克隆抗體所識別的一種黏液性糖蛋白，基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的重要成員，參與消化道腫瘤的進(jìn)展[2]，CA199和MMP-2在腫瘤中均高表達(dá)，關(guān)于二者在不同臨床特征的關(guān)系及相關(guān)性，目前尚未見報道。本實(shí)驗(yàn)關(guān)注胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的檢測情況，探討其表達(dá)的關(guān)系及意義。
　　1　資料和方法
　　1.1　臨床資料

　　收集2009年1月～2010年12月在我院診斷治療、并經(jīng)術(shù)后病理確診為胰腺癌患者，共90例，其中男性51例，女性39例，年齡36～78歲，平均59.2歲。納入標(biāo)準(zhǔn)均符合WHO消化系統(tǒng)腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)兩位病理主治醫(yī)師共同閱片后確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其它系統(tǒng)惡性腫瘤的患者;(2)伴有風(fēng)濕免疫性疾病的患者。選取同期健康體檢成人血清90例作為對照組。二組在性別構(gòu)成、年齡、體重等相關(guān)因素的比較中，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。
　　1.2　CA199和MMP-2的檢測
　　觀察組患者手術(shù)前1～2天的次日清晨空腹抽取靜脈血10 mL，經(jīng)枸椽酸鈉抗凝后，以3 000 rpm離心10 min，留取血漿，于-20 ℃冰箱中凍存?zhèn)溆?對照組采血及保存方法同上，并均在取血后一個月內(nèi)集中檢測。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測血清中MMP-2的表達(dá)。應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光原理檢測CA199的表達(dá)。操作由同一檢驗(yàn)師操作，避免人為誤差。
　　1.3　統(tǒng)計學(xué)處理
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SAS 6.12統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，并計算其相關(guān)性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2　結(jié)果

　　2.1　CA199和MMP-2在觀察組與對照組中的表達(dá)

　　觀察組患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)量明顯高于對照組，t分別為19.23、20.13，P均<0.01。見表1。表1　CA199和MMP-2在觀察組與對照組中的表達(dá)

　　2.2　觀察組不同臨床特征患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)
　　觀察組患者血清中CA199表達(dá)量與分化程度、神經(jīng)浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(t分別為13.25、8.05、7.64，P均<0.01)，MMP-2表達(dá)量與分化程度、神經(jīng)浸潤及轉(zhuǎn)移有關(guān)(t分別為7.64、8.75、11.20，P均<0.05)。見表2。表2　觀察組不同臨床特征患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)
　　2.3　胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2表達(dá)的關(guān)系
　　對胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.38，P=0.032 2)。
　　3　討論

　　胰腺癌是消化道常見的惡性腫瘤，近年我國胰腺癌發(fā)病率明顯上升，居消化道腫瘤死亡原因的第二位[3]。胰腺癌的預(yù)后很差，綜合治療后的5年生存率僅為1%～5%，原因之一就在于胰腺癌的早期癥狀缺乏特異性。隨著醫(yī)學(xué)影像學(xué)的不斷進(jìn)步，結(jié)合血清腫瘤標(biāo)記物測定，胰腺癌的早期診斷水平也有了顯著的提高。腫瘤標(biāo)志物是指腫瘤細(xì)胞分泌或脫落到體液或組織中的物質(zhì)，或是宿主對體內(nèi)新生物反應(yīng)產(chǎn)生并進(jìn)入到體液或組織中的物質(zhì)[4]。CA199是一種與消化道腫瘤等相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，其發(fā)展與胰腺癌的發(fā)展階段密切相關(guān)。有研究認(rèn)為CA199水平越高，其中位生存期越短，而CA199低者，預(yù)后較好。因此早期檢測可能對腫瘤的預(yù)后有一定價值[5]?；|(zhì)金屬蛋白酶是一組結(jié)構(gòu)上具有極大同源性、能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的內(nèi)肽酶的總和，因含有金屬離子(鋅、鈣)而得名。MMPs 以酶原形式分泌[6]，幾乎能降解細(xì)胞外基質(zhì)的所有成分的酶，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中具有重要意義，人們關(guān)注多是的MMP-2。MMP-2也稱明膠酶A，在體內(nèi)可由多種細(xì)胞分泌、如結(jié)締組織細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、粒細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等，并具有明膠酶的活性，以酶原的形式分泌，激活后主要降解IV型膠原、纖維粘連蛋白、彈性蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，其在組織與血液中均高表達(dá)[7,8]。
　　本實(shí)驗(yàn)通過對90例胰腺癌患者的血清進(jìn)行CA199和MMP-2的檢測，結(jié)果顯示胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2的表達(dá)明顯高于正常對照組，提示CA199和MMP-2在胰腺癌的發(fā)生中起一定作用。結(jié)果顯示CA199和MMP-2均與胰腺癌的分化程度、神經(jīng)浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示CA199和MMP-2參與了胰腺癌的進(jìn)展。由于分化程度與轉(zhuǎn)移均與患者的預(yù)后相關(guān)，也提示早期檢測二者的表達(dá)可能對判斷預(yù)后有一定價值，本實(shí)驗(yàn)均為術(shù)前的血液標(biāo)本，標(biāo)本留取簡單，方便，檢測后對臨床診斷和指導(dǎo)治療均有一定幫助，因此，臨床中可以應(yīng)用。本研究對結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析，顯示二者具有正相關(guān)性，提示二者可能具有共同作用，但是其機(jī)理和作用途徑還需要更多基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，也需要我們在后續(xù)研究中擴(kuò)大樣本后進(jìn)一步明確。腫瘤發(fā)展過程中細(xì)胞外基質(zhì)的破壞需要間質(zhì)細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的不同蛋白酶的協(xié)同作用，在腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移過程中，細(xì)胞外基質(zhì)的基底膜降解是基本的一步，主要是MMP-2發(fā)揮作用[9]。由于腫瘤組織中有新生的豐富血管，因此，CA199和MMP-2在腫瘤中分泌后，可進(jìn)入血液循環(huán)中，使外周血中較容易檢測到CA199和MMP-2的表達(dá)。
　　總之，胰腺癌患者血清中CA199和MMP-2表達(dá)量增加，二種蛋白可能參與胰腺癌的發(fā)生發(fā)展，聯(lián)合檢測CA199和MMP-2的表達(dá)可能對判斷病情及預(yù)后有重要意義。
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