應(yīng)用LCT技術(shù)研究慶陽(yáng)市婦女宮頸癌與HPV的相關(guān)性

　　作者：黎云,牟小娟　　作者單位：甘肅慶陽(yáng)，慶陽(yáng)市人民醫(yī)院
　　宮頸癌的發(fā)病率及死亡率均居?jì)D科惡性腫瘤之首，全世界每年新發(fā)病例約46.6萬(wàn),我國(guó)約13萬(wàn)。我市為宮頸癌的高發(fā)區(qū)，并且一旦發(fā)現(xiàn)多數(shù)已為浸潤(rùn)癌，屬臨床中晚期，患者壽命明顯縮短。研究表明，宮頸癌是HPV感染性疾病[1]，是可以預(yù)防、可以通過早期診斷進(jìn)而治愈的疾病。HPV一般在感染20年后才致癌，宮頸癌前病變(CIN)及原位癌發(fā)展至浸潤(rùn)癌約8～12年[2]。2005年我院與中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所腫瘤醫(yī)院合作，應(yīng)用LCT技術(shù)對(duì)慶陽(yáng)市1997名已婚婦女進(jìn)行宮頸癌、癌前病變及HPV檢測(cè)，對(duì)宮頸病變和HPV感染狀況進(jìn)行了調(diào)查，總結(jié)出我市婦女宮頸病變與HPV亞型的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

　　1 資料與方法

　　1.1 研究對(duì)象 年齡在25～65歲之間、無(wú)子宮切除術(shù)和宮頸手術(shù)史、目前未懷孕、無(wú)骨盆放射治療史，沒有參加過普查的已婚婦女。

　　1.2 標(biāo)本采集 每一婦女采集一份LCT標(biāo)本，用特制毛刷從受試對(duì)象宮頸順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈后立即放入裝有細(xì)胞保存液的小瓶中，離心后，分離標(biāo)本中的黏液、血液和炎性細(xì)胞，細(xì)胞經(jīng)自然沉淀轉(zhuǎn)移到涂有黏附劑的載玻片上制成直徑為13mm的超薄層細(xì)胞。

　　1.3 檢測(cè)方法 中國(guó)腫瘤醫(yī)院細(xì)胞學(xué)專家對(duì)標(biāo)本進(jìn)行閱片后按TBS診斷系統(tǒng)做出診斷報(bào)告并同時(shí)進(jìn)行HPV病毒檢測(cè)。HPV陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行HPV DNA檢測(cè)，采用目前世界上新的HPV檢測(cè)—第二代雜交捕獲試驗(yàn)(HC-Ⅱ)。

　　1.4 結(jié)果判定 診斷陽(yáng)性指標(biāo)定為標(biāo)本中檢出的HPV DNA≥1.0pg/ml。細(xì)胞學(xué)大于ASC-US者均進(jìn)行陰道鏡下宮頸口四象限活檢及頸管刮術(shù)。

　　1.5 統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)方法 按照病理結(jié)果獲得的各組人群HPV檢出率差異的比較，以及按照年齡分組HPV檢出率的比較均采用χ2檢驗(yàn)。HPV感染與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤關(guān)系研究采用Logistlc回歸分析方法，以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，分析HPV感染與宮頸病變的相關(guān)性。

　　2 結(jié)果

　　2.1 LCT及病理結(jié)果 見表1。由表1可以看出宮頸LCT檢查ASC-US以上患者與病理結(jié)果符合率高，但細(xì)胞學(xué)正常而HPV陽(yáng)性患者仍有宮頸病變可能。

　　2.2 HPV感染與宮頸病變程度 見表2。表2顯示隨著宮頸病變的加重HPV感染率呈趨勢(shì)性增加(χ2=444.04，P≤0.001) 。

　　2.3 HPV亞型檢查結(jié)果 見表3。

　　3 討論

　　3.1 宮頸液基細(xì)胞學(xué)(LCT)在宮頸癌診斷中的作用[3] LCT檢測(cè)中LSIL以上患者病理檢查示宮頸病變率為90%，而大多數(shù)患者肉眼無(wú)明顯異常，亦無(wú)明顯癥狀，對(duì)宮頸癌及宮頸病變的早期診斷起非常重要的作用。

　　3.2 HPV感染與宮頸癌危險(xiǎn)性的關(guān)系 自HAUSEN提出HPV可能與宮頸癌發(fā)病有關(guān)的假設(shè)后，國(guó)內(nèi)外學(xué)者就兩者的關(guān)系進(jìn)行了大量的研究[4]，所有結(jié)果均顯示HPV感染與宮頸癌有明顯的相關(guān)性[5]。本文研究說明HPV感染是當(dāng)?shù)貙m頸癌高發(fā)的主要危險(xiǎn)因素。隨著HPV檢測(cè)技術(shù)水平的提高，HPV與宮頸癌病因關(guān)系的證據(jù)愈加充分[6]。表1 宮頸LCT與病理結(jié)果 表2 各級(jí)宮頸病變HPV感染狀況表3 HPV亞型檢查結(jié)果注：此表顯示我市婦女感染HPV的亞型主要為HPV31、35

　　3.3 HPV感染的流行情況 本次研究是采用HC-Ⅱ，檢測(cè)婦女宮頸和陰道細(xì)胞中HPV DNA，其原理是利用對(duì)雜交捕獲信號(hào)的擴(kuò)大和化學(xué)發(fā)光信號(hào)的檢測(cè)來確定HPV亞型(13種高危型HPV　DNA包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型)。該人群的高危型HPV總感染率為15.9%，所有宮頸癌和CIN Ⅲ對(duì)象及95.3%的CIN Ⅱ?qū)ο驢PV感染陽(yáng)性，CIN Ⅰ和正常對(duì)象的HPV感染率分別為80.0%和7.0%。與以往的HPV調(diào)查相比，本研究中HPV檢出率明顯增加，原因在于HC-Ⅱ的靈敏度高、特異性好，檢測(cè)的HPV種類增多。研究表明我市宮頸病變患者的HPV的主要亞型為HPV31、35。區(qū)分HPV型別，尋找感染高發(fā)區(qū)婦女主要的HPV型別，有利于疫苗的研究。

　　3.4 HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌防治中的作用 在過去的幾十年中，細(xì)胞學(xué)普查取得了很大的成就，但存在的大弊病是假陰性率較高(15%～40%)，造成假陰性患者不能得到及時(shí)診治，而且這種方法主觀性較強(qiáng)，很難標(biāo)化。HC-Ⅱ則避免了這些問題，它可靈敏地檢出高度宮頸病變和癌癥，盡管假陽(yáng)性率較細(xì)胞學(xué)高，適于作大人群的初篩手段。在衛(wèi)生資源差、醫(yī)護(hù)人員短缺的地區(qū)，以HPV檢測(cè)為宮頸癌的初篩手段更具有實(shí)際意義。有研究發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染陽(yáng)性、宮頸涂片正常的婦女在隨訪3、4個(gè)月后，其宮頸細(xì)胞發(fā)生異常的風(fēng)險(xiǎn)度高于HPV陰性對(duì)象(28.2：1.0)，而且細(xì)胞學(xué)發(fā)生的90%以上是高危型HPV的持續(xù)感染者。因此，對(duì)此次研究中高危型HPV陽(yáng)性而宮頸細(xì)胞學(xué)正常的對(duì)象要每年定期隨訪。目前對(duì)HPV檢測(cè)的成本效益分析及其在臨床和人群中的應(yīng)用還在探索中，它能否成為更合理的篩查手段以及能否終降低宮頸浸潤(rùn)癌發(fā)病率和死亡率，尚需開展更多的研究工作。