增強光散射分辨率，促進多維流式細胞分析

        多維流式細胞儀可同時進行多參數(shù)測量，在特定空間內(nèi)對細胞群進行分析。若要實現(xiàn)該多維空間的合理使用，每個特定參數(shù)需提供額外信息來識別細胞群，并確保其動態(tài)范圍能夠大限度地加以利用。本研究就白細胞的光信號散射情況進行了詳細說明，從而促進了多維流式細胞分析的開展。

        細胞制備技術的提升對獲得高分辨率光散射信號至關重要，可以實現(xiàn)粒細胞、單核細胞、顆粒狀和非顆粒狀淋巴球的完全分離。對搜集前向散射光的角度進行了改進，以提升白細胞的區(qū)分度。盡管正交光散射信號能夠區(qū)分顆粒狀和非顆粒狀淋巴細胞，但仍無法利用線性或對數(shù)函數(shù)的形式將分辨率和動態(tài)范圍顯示出來。 而在正交光散射信號中應用多項式函數(shù)，則可將白細胞全部以高分辨率顯示出來。 關聯(lián)前向和正交光散射信號可實現(xiàn)高分辨率光散射與非線性顯示的結合，使細胞群呈現(xiàn)等距分布狀態(tài)。使用這種方式，可將外周血中性粒細胞、嗜酸細胞、嗜堿粒細胞、單核細胞、顆粒狀和非顆粒狀淋巴細胞等都顯示出來，占據(jù)與正交和前向光散射相關的不同位置。出人意料的是，嗜堿粒細胞是處在了顆粒狀淋巴和單核細胞附近而非中性和嗜酸性粒細胞。

        流式細胞術中的人體白細胞光散射特性主要應用于區(qū)分淋巴細胞、單核細胞和粒細胞。前向光散射信號與細胞的大小和折光率有關，而正交光散射信號則與細胞的粒度有關。

        一項對正交光散射信號更進一步的分析顯示出了淋巴細胞成分的差異，即非顆粒狀淋巴細胞的信號比顆粒狀的要低。此外，該方法還顯示了白血球的正交光散射信號在不同疾病狀態(tài)下的變化情況。

        高分辨率光散射要在佳角度收集散射參數(shù)，并對散射光的收集光路進行優(yōu)化。改進細胞制備方法對大限度地實現(xiàn)對細胞群的分離至關重要。改變制備流程可能導致細胞群分辨率的提高或降低。通過光散射，可從測量中排除受損細胞和無核細胞的干擾，從而提高細胞群的分辨率。

        正交光散射信號的動態(tài)范圍不允許在相同線性尺度上同時觀察淋巴細胞群和中性粒細胞。本研究提供了一種新方法，通過對正交光散射信號進行數(shù)字信號處理轉換，實現(xiàn)了白細胞群在光散射顯示中更加均衡的分布。這種轉換提升了淋巴細胞分辨率，實現(xiàn)了細胞的可視化，而動態(tài)范圍的確定對中性粒細胞的觀察也十分重要。因此，重新對細胞群在多維空間進行定位可使細胞群在制備過程中實現(xiàn)完美分離。