COX2在胃癌組織中的表達(dá)及與Hp感染的關(guān)系

　　作者：劉江月,徐洪平,張代娟　　作者單位：濰坊醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，山東 濰坊

　　【摘要】目的探討環(huán)氧合酶2(COX2)的表達(dá)與胃癌發(fā)生的關(guān)系及幽門螺桿菌(Hp)感染對COX2表達(dá)的影響，為研究Hp感染致胃癌的機(jī)制及以COX2為靶標(biāo)的胃癌防治提供理論依據(jù)。方法 采用免疫組織化學(xué)染色法(SP法)檢測對照組10例正常胃黏膜及實(shí)驗(yàn)組50例胃癌組織中COX2的表達(dá)情況，用快速尿素酶診斷法和13C呼氣試驗(yàn)兩種方法檢測胃癌患者Hp感染狀況，分析它們在不同組織中的表達(dá)及與胃癌的關(guān)系。結(jié)果 胃癌組織COX2的陽性表達(dá)率明顯高于正常胃黏膜(P<0.001);COX2的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。有Hp感染的胃癌組織中COX2的陽性表達(dá)率明顯高于未感染者(P<0.05)。結(jié)論 COX2參與胃癌的發(fā)生發(fā)展且與胃癌的侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有一定的關(guān)系;Hp感染可能上調(diào)胃癌組織中COX2的表達(dá)。

　　【關(guān)鍵詞】 胃腫瘤;COX2;Hp感染;免疫組織化學(xué)

　　環(huán)氧合酶(COX)是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶，包括COX1和COX2兩種亞型，COX2的過度表達(dá)可能是促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展的原因之一〔1，2〕。幽門螺桿菌(Hp)感染與胃癌發(fā)生相關(guān)，但其確切致癌機(jī)制目前仍不十分清楚。有學(xué)者認(rèn)為 Hp可上調(diào)COX2 mRNA的表達(dá)〔3〕。COX2在胃癌中的表達(dá)規(guī)律及與Hp感染相關(guān)性的研究報(bào)道較少。本研究旨在探討COX2在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及與Hp感染的關(guān)系，為防治胃癌提供理論依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料

　　2006年3月至2007年3月在本院腫瘤外科手術(shù)切除的胃癌標(biāo)本共50例。其中，男38例，女12例，年齡33～77歲，平均61.3歲。所選胃癌患者術(shù)前均已進(jìn)行Hp檢測，但未行化療、放療，并且排除胃癌家族史。有Hp感染者29例。2006年12月取自本院胃鏡室鏡下活檢正常胃黏膜標(biāo)本10例(胃鏡標(biāo)本)作為對照。

　　1.2 方法

　　1.2.1 采用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測COX2的表達(dá)

　　所有標(biāo)本經(jīng)10%的中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，常規(guī)HE染色明確病理診斷。免疫組織化學(xué)步驟按說明書進(jìn)行，用PBS液代替一抗作陰性對照。

　　結(jié)果判斷以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為COX2陽性細(xì)胞。使用Olympus病理圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行免疫組織化學(xué)分析。無陽性著色細(xì)胞為陰性(-)，陽性著色細(xì)胞<25%為弱陽性(+)，陽性著色細(xì)胞25%～50%為陽性()，陽性著色細(xì)胞>50%為強(qiáng)陽性()。

　　1.2.2 Hp感染檢測

　　用Hp尿素酶快速診斷法及13C呼氣試驗(yàn)檢測。兩種方法檢測均為陽性者視為Hp感染陽性。

　　1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

　　采用SPSS25.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用χ2檢驗(yàn)和四格表精確概率法。

　　2 結(jié)果

　　2.1 免疫組化染色結(jié)果

　　COX2陽性染色主要位于胃癌細(xì)胞質(zhì)中，呈深黃色彌漫性分布。間質(zhì)細(xì)胞(炎性細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞)和平滑肌細(xì)胞中亦可見散在部分表達(dá)。

　　2.2 COX2在胃癌組織和正常胃黏膜組織中的表達(dá)

　　COX2在胃癌組織中陽性表達(dá)43例，陽性表達(dá)率為86%;在正常胃黏膜組織中陽性表達(dá)1例，陽性表達(dá)率為10%，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。

　　2.3 COX2在胃癌組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

　　COX2表達(dá)與胃癌患者性別(χ2=0.013，P=0.928，χ2=0.043，P=0.760)、年齡(χ2=0.241，P=0.433，χ2=0.134，P=0.500)無關(guān)。COX2在胃癌組織中的表達(dá)與腫瘤部位、臨床病理分期、浸潤深度、分化程度無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中陽性表達(dá)率(94.4%)明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(64.3%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 COX2表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

　　2.4 COX2在不同Hp感染者胃癌組織中的表達(dá)

　　胃癌組織中Hp感染陽性率為58%。COX2在Hp感染陽性胃癌組織中陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為86.2%;在Hp感染陰性胃癌組織中陽性表達(dá)10例，陽性表達(dá)率為47.6%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

　　3 討論

　　COX是花生四烯酸代謝的關(guān)鍵限速酶，目前已發(fā)現(xiàn)至少有兩種亞型：COX1和COX2。正常狀態(tài)下COX2活性很低，在某些病理狀態(tài)下COX2表達(dá)可迅速上升，如在腫瘤組織中就可出現(xiàn)高表達(dá)。已有研究表明,在結(jié)腸癌、食管癌及巴氏食管中表達(dá)增加〔4〕。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，COX2在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為86%，顯著高于在正常胃黏膜組織中的陽性表達(dá)率為10%，說明COX2可能與胃癌的發(fā)生有關(guān)。COX2在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的具體作用尚不清楚,但普遍認(rèn)為 COX2對胃癌的發(fā)生發(fā)展有促進(jìn)作用。COX2能夠促進(jìn)細(xì)胞黏附，抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生，促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移〔5～7〕。Chen等〔8〕對4種結(jié)腸癌細(xì)胞株研究發(fā)現(xiàn)，浸潤能力強(qiáng)的HT29/Inv3細(xì)胞株COX2表達(dá)強(qiáng)，而COX2抑制劑伊托度酸(etodolac)可顯著抑制其浸潤能力，從而證實(shí)了COX2能提高結(jié)腸癌細(xì)胞的浸潤轉(zhuǎn)移潛能，促進(jìn)結(jié)腸癌的惡性發(fā)展。本研究顯示，COX2表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。由于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的獨(dú)立因素，因此，COX2表達(dá)增高，常提示預(yù)后較差。本研究表明COX2表達(dá)與胃癌組織學(xué)分化程度無關(guān)，這與Ohno等〔9〕報(bào)道一致。

　　Hp感染引起胃癌的致癌機(jī)制目前仍不十分清楚。Hahm等〔10，11〕研究發(fā)現(xiàn)Hp感染可以激活NFB從而誘導(dǎo)COX2和IL8的表達(dá)，這可能是Hp感染導(dǎo)致胃炎和胃癌機(jī)制之一。還有研究發(fā)現(xiàn)上調(diào)胃癌細(xì)胞及胃癌組織中COX2的表達(dá)，并能被COX2抑制劑所阻斷〔12，13〕。本研究結(jié)果表明在所檢測的胃癌患者中Hp感染率高達(dá)58%，在Hp感染的胃癌組織中的表達(dá)顯著高于無感染的胃癌組織，表明COX2的表達(dá)與Hp感染有關(guān)，而在胃癌組織中COX2呈高表達(dá)，則可能與Hp致胃癌機(jī)制有關(guān)。

　　綜上所述，Hp感染與COX2共同參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展過程。這些可能為胃癌的早期診斷及在胃癌的防治、預(yù)防復(fù)發(fā)中提供理論依據(jù)，Hp與COX2抑制劑的應(yīng)用可能都是非常重要的措施。