血細(xì)胞分析儀與鏡檢法檢測低值血小板結(jié)果比較分析

【摘要】 目的 就血細(xì)胞分析儀與鏡檢法計數(shù)低值血小板結(jié)果進(jìn)行比較分析。方法 選取低值血小板患者血標(biāo)本，用儀器進(jìn)行血小板計數(shù)，同時血涂片間接計數(shù)血小板并觀察形態(tài)，以人工鏡檢法為參考。結(jié)果 鏡檢結(jié)果同儀器結(jié)果存在顯著差異（P<0.05）。結(jié)論 對低值血小板結(jié)果及儀器有錯誤提示或PLT直方圖異常時，要進(jìn)行手工復(fù)檢或重新采血檢測。
【關(guān)鍵詞】 血細(xì)胞分析儀 鏡檢法 低值血小板 比較
血小板計數(shù)是血液檢查的一個重要指標(biāo)，特別是對血小板減少的患者，血小板計數(shù)是臨床決定是否進(jìn)行血小板輸注的重要參考指標(biāo)，因此準(zhǔn)確計數(shù)血小板顯得尤為重要?，F(xiàn)在，就COULTER LH750計數(shù)低值血小板并與顯微鏡檢進(jìn)行比較分析，以評價低值血小板計數(shù)的準(zhǔn)確性。
1 材料與方法
1.1材料
1.1.1標(biāo)本 選取2009年6-10月住院患者標(biāo)本100例，年齡2-68歲，男性67例，女性32例。血小板均<50×109/L。
1.1.2儀器 血液分析儀COULTER LH750,OLYMPUS顯微鏡。
1.1.3試劑 貝克曼公司血球配套試劑及質(zhì)控液，實(shí)驗室自配瑞氏染液及草酸銨溶液（均按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）配制）。
1.2方法
1.2.1抽取患者1.5mg/mlEDTA-K2抗凝靜脈血3ml，每份標(biāo)本制備血涂片各兩張。
1.2.2 LH-750由廠家定期校準(zhǔn)并參加省室間質(zhì)評，成績優(yōu)異。儀器每天進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，結(jié)果均在控。
1.2.3儀器血小板計數(shù)：
每份樣本在儀器上均測定2次，記錄結(jié)果（數(shù)據(jù)，錯誤提示及直方圖），求其均值。實(shí)驗在采血后兩小時之內(nèi)完成。
1.2.4血涂片分析：涂片經(jīng)瑞氏染色，選擇厚薄適宜區(qū)，計數(shù)1000個紅細(xì)胞并同時計數(shù)所見血小板，求得血小板/紅細(xì)胞之比值。再將此值×紅細(xì)胞數(shù)，求得血小板數(shù)，并觀察血小板及紅細(xì)胞等形態(tài)[1]。
1.2.5血小板計數(shù)參考方法：WHO血小板計數(shù)方法：取20ul血加入10g/L草酸銨稀釋液0.38ml，溶血10mim后充入計數(shù)板放置30min，用顯微鏡計數(shù)中央大方格四周4個中方格和中央1個中方格中血小板數(shù)。當(dāng)血小板特別少時，僅計數(shù)中央整1大格，此操作均由有經(jīng)驗的檢驗員用雙盲法計數(shù)，取兩次結(jié)果的均值。
1.2.6統(tǒng)計學(xué)方法：各項數(shù)據(jù)用 ±S表示，組間比對采用t檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。
2 結(jié)果
2.1儀器血小板計數(shù)后出現(xiàn)R、曲線擬合不好及有報警提示病例占65%。
2.2血涂片觀察紅細(xì)胞及血小板形態(tài)，并依此分組，比較儀器法、血涂片法與鏡檢法結(jié)果，儀器法與鏡檢法計數(shù)結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）,血涂片法與鏡檢法計數(shù)結(jié)果比較，大血小板組、小紅細(xì)胞組、紅細(xì)胞碎片組差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），血小板聚集組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05).
3 討論
3.1血細(xì)胞分析儀是計數(shù)血小板的主要儀器,LH750采用電阻抗法計數(shù)2-20fl 的血小板數(shù)量，再擬合出一條0-70fl的曲線，目的是排除計數(shù)干擾，但條件不滿足時，儀器不能給出擬合曲線，這時血小板數(shù)值后出現(xiàn)R，通常導(dǎo)致R的原因有:出現(xiàn)異常形態(tài)的血小板，血小板發(fā)生聚集，存在細(xì)胞碎片如：紅細(xì)胞碎片、血小板大小不一（輸血后），電磁波或噪音干擾小孔計數(shù)等。 本實(shí)驗結(jié)果表明，儀器曲線擬合不好或報警提示占65%，血涂片鏡檢所見，大血小板、小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片及血小板聚集病例共53%，說明在低值病理標(biāo)本中干擾物質(zhì)較常見，導(dǎo)致血小板計數(shù)結(jié)果出現(xiàn)偏差，小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片的體積與血小板分布體積接近時，儀器識別不清將誤認(rèn)為是血小板，使檢測結(jié)果偏高，而將大血小板誤認(rèn)為紅細(xì)胞計數(shù)，將血小板凝集團(tuán)塊當(dāng)作白細(xì)胞來計數(shù)，使計數(shù)假性減少[2]。
3.2對血小板嚴(yán)重減少的患者，由于超出了電阻抗法檢測血小板的線性范圍，須用參考方法進(jìn)行復(fù)檢。本組資料顯示，大血小板組、小紅細(xì)胞組及紅細(xì)胞碎片組，血涂片法與鏡檢法結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義，采用血涂片法可反映患者血小板數(shù)量及形態(tài)特點(diǎn)。有人認(rèn)為，采用血涂片計數(shù)血小板此法雖不十分精確，但可從另一側(cè)面直觀地“間接”計數(shù)血小板，還可觀察血小板的大小、形態(tài)、有無聚集及聚集體大小等，是一種簡單易行的方法[3]。但對血小板聚集組，血涂片法與鏡檢法結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可能與血小板聚集成團(tuán)、血小板分布不均，導(dǎo)致計數(shù)較困難有關(guān)。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] Kunicka JE,Fischer G,Murphy J,et al. Improved platelet counting: a proposed new reference procedure [J]. Brit J Heamat,2000,10(8):228-235.
[2] TATSUMIN ,TSUDA I,FUNAHARA Y.Assessment of hematological data obtained by the aperture impedance method in blood from patients with thalassemia or hemoglobinpoathy[J].ICMR Ann,1998,8:49-60.
[3] 楊良.血涂片血小板計數(shù)方法的意義[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009,1(6):17-18.