血型鑒定和交叉配血的影響因素及解決方法

作者：趙鋒 劉曉麗 楊亦青 王愛東 李延偉 李天君

作者單位：河北省張家口市中心血站，河北 張家口 075000

 

【關(guān)鍵詞】  血型鑒定

    準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血是臨床安全有效輸血的重要保證。輸血配合是選擇用于受者的血液，使輸血的成分能在受者體內(nèi)有效存活，無不良反應(yīng)，即輸入的紅細(xì)胞在受者體內(nèi)必須不凝集或不溶血，輸入的血漿成分不導(dǎo)致受者自身紅細(xì)胞顯著破壞，才能使受者獲得恢復(fù)健康所需的血液[1]。影響血型鑒定和交叉配血的因素很多，筆者結(jié)合工作實(shí)際就實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的一些問題及其對(duì)策報(bào)告如下。

    1  標(biāo)本和試劑因素

    1.1  標(biāo)本  交叉配血和血型鑒定血液標(biāo)本的嚴(yán)格要求是安全輸血的關(guān)鍵性措施之一。首先要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行科學(xué)管理，確保標(biāo)本一一對(duì)應(yīng)，其標(biāo)識(shí)、血液量、紅細(xì)胞或血漿的質(zhì)量符合實(shí)驗(yàn)要求和受者血液的身體狀態(tài)，同時(shí)避免血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生。標(biāo)本一般要求離體后盡快實(shí)驗(yàn)，長不能超過3d，每次輸血后受血者和供血者的血標(biāo)本應(yīng)在2℃～8℃保存7d[2]。患者的藥物使用有時(shí)也對(duì)實(shí)驗(yàn)有一定影響，一般受者使用肝素治療，應(yīng)用硫酸魚精蛋白對(duì)抗使標(biāo)本凝結(jié)；如果受者使用右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等治療，應(yīng)注意將紅細(xì)胞洗滌。

    1.2  試劑因素  血型定型試劑是做好定型的基礎(chǔ)?，F(xiàn)在單克隆試劑是通過雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的，其效價(jià)、特異性、親和力都較人血清有很大進(jìn)步，但試劑的運(yùn)輸、貯存等條件不適可導(dǎo)致試劑變質(zhì)失效，造成鑒定或配血錯(cuò)誤。在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行試劑外觀、效價(jià)等項(xiàng)目質(zhì)量控制。不同抗凝劑的血液制備的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞質(zhì)量也不同，各實(shí)驗(yàn)室依據(jù)要求正確配制紅細(xì)胞濃度。常見的抗D試劑主要有IgM型、IgG型膠IgM+IgG型三種。

    2  ABO血型鑒定和交叉配血

    2.1  冷凝集素

    在ABO血型鑒定和交叉配血的過程中，冷凝集素是影響ABO血型正反不符和交叉配血不合的常見原因。正常人血清中冷凝集素效價(jià)一般不高，且在4℃以下時(shí)才有活性。但由于人免疫系統(tǒng)的差異，在惡性腫瘤或病原體感染后有時(shí)冷反應(yīng)性自身抗體可異常增高，造成溶血性貧血。這種冷凝集素效價(jià)在4℃可高于1000，用37℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞，操作時(shí)在37℃環(huán)境可以排除冷凝集素的干擾。

    2.2  自身免疫性溶血性貧血

    紅細(xì)胞被自身抗體強(qiáng)烈致敏后將干擾ABO定型，且自身抗體的存在會(huì)導(dǎo)致交叉配血不合，選擇合適的試驗(yàn)方法對(duì)紅細(xì)胞上結(jié)合的抗體做放散處理，確定抗體的特異性。如果抗體屬于同種抗體，則交叉配血時(shí)應(yīng)選取該抗原陰性的獻(xiàn)血者的血液。如果該抗體無法確定特異性，則交叉配血時(shí)要根據(jù)患者自身紅細(xì)胞與自身血清的對(duì)照反應(yīng)選取較弱反應(yīng)的獻(xiàn)血者血液，因?yàn)樽陨砜贵w的干擾而發(fā)生ABO正反定型不相符時(shí)，可用37℃～45℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞三次，或者用放散后的紅細(xì)胞（放散方法需不破壞紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)），血清定型則可用洗滌或放散后的紅細(xì)胞將血清中的自身抗體吸收后再進(jìn)行。

    2.3  弱凝集

    血型試驗(yàn)是抗原抗體反應(yīng)，當(dāng)患者紅細(xì)胞上抗原異?；蜓逯写嬖贏BO血型以外的不規(guī)則抗體時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致減弱的或缺少的凝集反應(yīng)?？乖惓０ǎ孩賮喰?，這種亞型紅細(xì)胞抗原性較弱，可以通過亞型定型試劑來具體定型。②紅細(xì)胞抗原形成不足或敏感性降低，如新生兒、老年人及少數(shù)惡病質(zhì)患者。鑒定血型時(shí)要注意正反定型的結(jié)合，加用抗H和抗A，B型標(biāo)準(zhǔn)血清、A2紅細(xì)胞等檢查唾液中的血型物質(zhì)，必要時(shí)作吸收放散試驗(yàn)以確定。若血清中存在不規(guī)則抗體可在反定型用O細(xì)胞加以鑒定，有些亞型因?yàn)榭乖哪承┪稽c(diǎn)缺失，也會(huì)產(chǎn)生相對(duì)于缺失抗原位點(diǎn)的抗體，這些抗體的產(chǎn)生有助于亞型的判定。

    2.4  細(xì)菌性凝集

    常見有類B凝集，A型或O型病人因大腸桿菌O86感染，從而使紅細(xì)胞上獲得類B抗原，能與抗B抗體發(fā)生凝集，表現(xiàn)為B 或AB型。其不受溫度影響，病情好轉(zhuǎn)類B凝集即消失。另外紅細(xì)胞被細(xì)菌或細(xì)菌酶污染，紅細(xì)胞上的T抗原被激活，與供血者中抗T抗體發(fā)生凝集。此種凝集在4℃和37℃之間隨著溫度的升高凝集程度逐漸減弱，在37℃時(shí)弱或消失。

    2.5  混合外觀凝集現(xiàn)象

    出現(xiàn)混合外觀凝集的情況時(shí)一般要核對(duì)標(biāo)本，必要時(shí)可重新抽取血樣。患者在近期有過骨髓移植或輸血史、胎盤出血和白血病等應(yīng)在疾病恢復(fù)后再確定血型。其他原因如嵌合現(xiàn)象、A3亞型及Tn多凝集反應(yīng)等在定型時(shí)可幫助正確判斷血型。

    2.6  不規(guī)則抗體及亞型

    血型試驗(yàn)是抗原抗體反應(yīng)，當(dāng)患者血清中存在ABO型以外的IgM或IgG和IgM混合型不規(guī)則抗體時(shí)，必然會(huì)導(dǎo)致ABO正反定型不一致?？赏ㄟ^測定唾液中的血型物質(zhì)來鑒定ABO血型。由于受檢者紅細(xì)胞上有弱抗原，且抗原表達(dá)性特別弱，在紙片定型中很可能被錯(cuò)誤定型，另外抗A/抗B/抗AB血清的效價(jià)低或Ac/Bc/Oc等其他因素的影響，正反定型不相符，也可能被錯(cuò)定或無法確認(rèn)[3],應(yīng)用試管鹽水法鏡檢顯示抗A/抗B/抗AB管呈弱的混合外觀，正反定型相符，且經(jīng)吸收放散試驗(yàn)進(jìn)一步確定相應(yīng)的亞型。由于某些亞型紅細(xì)胞與抗A，B血清呈現(xiàn)出特異性反應(yīng)，因此同時(shí)采用抗A，B血清，而在反定型時(shí)加入O細(xì)胞可以檢出部分不規(guī)則抗體。對(duì)ABO血型正反定型不一致的標(biāo)本，正定型時(shí)加入抗H有助于檢測紅細(xì)胞表面H抗原的量，對(duì)鑒別亞型具有重要意義，同時(shí)有助于發(fā)現(xiàn)稀有血型，如孟買型等[4]。

    2.7  假凝集

    血清在室溫和37℃中，使紅細(xì)胞出現(xiàn)了假凝集，造成配血錯(cuò)誤。常見于某些肝病、傳染病、多發(fā)性骨髓瘤、霍金氏病、心肌梗塞、感染等病，或用紙片或玻片作血型鑒定時(shí)，時(shí)間過長水份蒸發(fā)引起紅細(xì)胞發(fā)生凝集，這種凝集在鏡下為緡錢狀，可看清紅細(xì)胞形態(tài)，患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，用生理鹽水稀釋或洗滌紅細(xì)胞可使凝集消失。

    3  Rh定型試驗(yàn)

    Rh血型系統(tǒng)可能是紅細(xì)胞血型系中復(fù)雜的一個(gè)血型系[1]。常規(guī)條件下只作Rh(D)定型。Rh（D）陰性的受者必須接受Rh（D）陰性的血液。臨床輸血前檢查Rh（D）血型是一個(gè)常規(guī)項(xiàng)目，但部分小型醫(yī)院目前還未開展這類項(xiàng)目，這對(duì)輸血安全帶來很大隱患。鑒定Rh血型抗原有不同的血清血技術(shù)，主要按定型試劑的性質(zhì)而確定，因此在作血型簽定時(shí)，應(yīng)對(duì)所用的定型試劑有全面的了解，才能避免假陽性和假陰性，正確地獲得定型結(jié)果。Rh血型定型方法主要包括三種方法，即玻片法、鹽水法和酶或間接抗球蛋白試驗(yàn)。試驗(yàn)過程中對(duì)照系統(tǒng)應(yīng)包括試劑對(duì)照和抗原陽性陰性對(duì)照，并對(duì)采用的試驗(yàn)介質(zhì)、濃度、溫度、離心條件等嚴(yán)格控制。Rh血型弱D是D的弱表現(xiàn)形式，即使很弱仍可能引起免疫反應(yīng)，若將弱D型血輸給D陰性受者，有可能免疫受者，使之產(chǎn)生抗D；弱D紅細(xì)胞輸入血清中已有抗D的受血者，輸入紅細(xì)胞會(huì)被加速破壞，從而引起溶血性輸血反應(yīng)，對(duì)于初篩為D陰性的獻(xiàn)血者，要分別用不同批次的IgG抗D試劑間接抗人球法進(jìn)行Rh陰性確認(rèn)，供者弱D型血作為D陽性血發(fā)放。臨床對(duì)于受者只做IgM抗D試驗(yàn)，若為陰性，不再做弱D檢測，應(yīng)把受者當(dāng)作D陰性，并輸注D陰性血。另外標(biāo)本污染和錯(cuò)誤、操作者自身技術(shù)及判斷錯(cuò)誤、病人用藥、輸血史及妊娠史等因素也影響血型定型和交叉配血，在試驗(yàn)過程中要密切聯(lián)系臨床和環(huán)境因素，科學(xué)排除影響血型鑒定和交叉配血的因素，確保輸血安全。

    2008年2月趙  鋒等：血型鑒定和交叉配血的影響因素及解決方法第1期2008年2月河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）第1期參考文獻(xiàn)

 

【參考文獻(xiàn)】
  1 王培華主編.輸血技術(shù)學(xué)\[M\].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.164168，152160

2 徐忠，沈行峰主譯.血站和輸血機(jī)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)\[S\].第21版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2003.4658

3 薛敏，劉毅.Bx血型鑒定1例報(bào)告\[J\].臨床輸血與檢驗(yàn)，2003，5（3）：215

4 馬曙軒，劉景漢，王全立,等.24例ABO血型正反定型不一致受血者的血型血清學(xué)分析\[J\].臨床輸血與檢驗(yàn)，2005，7（4）：280