新輔助化療對(duì)結(jié)腸癌組織中CD44V6、p21表達(dá)的影響及臨床意義

         【摘要】 目的 分析新輔助化療前后結(jié)腸癌組織中CD44V6及p21蛋白的表達(dá)差異，并探討 新輔助化療對(duì)結(jié)腸癌患者手術(shù)及預(yù)后的影響。方法 選擇濱州市中心醫(yī)院2009年1月至2011年 12月收治的結(jié)腸癌患者60例，將其隨機(jī)分為對(duì)照組及觀察組，各30例。對(duì)照組采用常規(guī)手術(shù)結(jié) 合術(shù)后常規(guī)化療的治療方案，觀察組患者在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上行術(shù)前新輔助化療。對(duì)比分析兩組患者術(shù)中檢出淋巴結(jié)陽(yáng)性率、術(shù)后復(fù)發(fā)率及3年生存率。結(jié)果 對(duì)照組患者化療前后CD44V6及p21蛋白表達(dá)差異不顯著；而觀察組患者兩種蛋白的陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組結(jié)腸癌患者3年內(nèi)存活率( 70.000-/0)顯著高于對(duì)照組患者存活率(46.670-/0)，兩組比較差異 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論新輔助化療能夠顯著降低結(jié)腸癌組織中CD44V6的表達(dá)，提高p21的表達(dá)，提示新輔助化療在改善結(jié)腸癌患者的預(yù)后、提高患者生存率方面具有重要意義，可以 在臨床上推廣應(yīng)用。

         【關(guān)鍵詞】新輔助化療；結(jié)腸癌；CD44V6; p21
         結(jié)腸癌是結(jié)腸黏膜上皮發(fā)生的惡性病變，為 消化道系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次 于胃癌。流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，全球結(jié)腸癌每年新增有例數(shù)近1OO萬(wàn)，每年有大約50萬(wàn)人死于結(jié)腸癌，病死率居所有癌癥第三位。：結(jié)腸癌常發(fā)生于 歐美等西方發(fā)達(dá)國(guó)家，近年來(lái)．隨著我國(guó)居民生 活水平的提高，我國(guó)結(jié)腸癌的發(fā)生率呈逐年增加的趨勢(shì)。新輔助化療是指在患者手手術(shù)前即給予進(jìn)行合理劑量和療程的化療手段．1982年Frei首 先提出了新輔助化療的概念．新輔助化療能不同 程度地減輕腫瘤負(fù)荷，減輕組織反應(yīng)性水腫，使 腫瘤縮小，臨床分期降低，提高手術(shù)切除的 機(jī)會(huì)，降低腫瘤復(fù)發(fā)及改善預(yù)后等[2-4]。本文回顧 性分析2009年1月至201 1年12月期間應(yīng)用新輔 助化療治療結(jié)腸癌患者的臨床資料，探討新輔助化療對(duì)結(jié)腸癌組織CD44V6、p21表達(dá)的影響，揭 示其對(duì)結(jié)腸癌患者手術(shù)及預(yù)后的影響。

         對(duì)象與方法

         1．對(duì)象：選擇2009年1月至201 1年12月濱州市中心醫(yī)院普外科收治的結(jié)腸癌患者60例，其 中高分化腺癌12例，中分化腺癌36例，低分化 腺癌12例；右半結(jié)腸癌1 8例，橫結(jié)腸癌23例，左半結(jié)腸癌19例；患者臨床分期為：Ⅱ期22例，Ⅲ期27例，Ⅳ期1 1例：將研究對(duì)象隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，各30例。觀察組男14例，女16例，年齡44~66歲，平均年齡為(51.6±0.9)歲；對(duì)照組男12例，女18例，年齡43~69歲，平 均年齡為( 55.7±0.8)歲。兩組患者經(jīng)過(guò)全面檢查后均未發(fā)現(xiàn)其他重大系統(tǒng)疾病，在年齡、性別、 腫瘤分化程度、腫瘤位置及臨床分期等方面比較 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05)，具有可比性。

          2．方法：所有納入研究的患者在入院后均行 常規(guī)檢查，并評(píng)估患者泵發(fā)病灶情況及身體狀況在患者治療過(guò)程中．觀察組與對(duì)照組患者均采用手術(shù)治療。根據(jù)腫瘤位置不同，行不同部位結(jié)腸 癌術(shù)，淋巴結(jié)清掃范圍至腸系膜下靜脈或結(jié) 腸中靜脈根部，術(shù)中嚴(yán)格無(wú)瘤操作：對(duì)照組患者 采取手術(shù)結(jié)合術(shù)后常規(guī)化療的治療方式，觀察組 在行結(jié)腸癌術(shù)前采用2個(gè)療程的為期6周的新輔助化療，新輔助化療用藥方案為：氟尿嘧啶 400 mg/m2，滴注時(shí)間≥Sh，第1~5天；奧沙利 鉑130 mg/m2，第1天給藥，靜脈滴注1.5 h；亞葉 酸鈣200 mg/m2，靜脈滴注1.5 h，第1~5天，3周后進(jìn)行第2次化療。觀察組患者在化療結(jié)束后2周進(jìn)行手術(shù)治療，術(shù)后采用與對(duì)照組相同的常規(guī) 化療，術(shù)后兩組患者均規(guī)律隨訪3年。

          3．觀察指標(biāo)：在治療前后均取觀察組及對(duì)照 組患者的癌變組織一塊，應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法 檢測(cè)患者CD44V6、p21蛋白在結(jié)腸癌組織中的表 達(dá)差異，術(shù)后觀察兩組患者術(shù)中清掃的淋巴結(jié)陽(yáng)性率、隨訪3年患者的腫瘤復(fù)發(fā)率及生存率。

         4．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用x檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

         結(jié) 果 1．兩組患者術(shù)后臨床預(yù)后的比較：經(jīng)過(guò)不同 方法的治療后，觀察組術(shù)中檢出淋巴結(jié)陽(yáng)性率為 7.030-/0，顯著低于對(duì)照組淋巴結(jié)陽(yáng)性率(16.670-/0)， 觀察組患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)的概率( 16.67%)亦明顯低于對(duì)照組患者復(fù)發(fā)的概率( 40.OOc7c)，兩組比較 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)：此外，行新輔助化 療的結(jié)腸癌患者3年生存率( 70.O07c)明顯高于對(duì)照組( 46.670-/0)（表1）：兩組患者不良反應(yīng)主要以惡心嘔吐、腹瀉以及血小板、白細(xì)胞和血紅 蛋白減少為主要表現(xiàn)。

         2．兩組患者新輔助化療前后CD44V6、 p21蛋白表達(dá)情況的比較：對(duì)照組患者化療前后CD44V6、p21蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；觀察組患者化療前CD44V6的蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于化療后的表達(dá)水平，而觀察組患者化療前p21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于化療后，觀察組患者化療前、后兩種蛋白的陽(yáng)性率差異均 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。 表1兩組患者術(shù)后臨床資料比較『例(%)]注：與對(duì)照組相比較，ap<0.05
         表2兩組患者化療后相關(guān)指標(biāo)陽(yáng)性率比較f例(%)]
         注：與對(duì)照組化療前相比較zP>0.05；與觀察組化療前相比較 hp<0.05
         討 論 新輔助化療亦稱術(shù)前化療，其臨床效果和價(jià) 值逐步受到重視，近年來(lái)作為一種重要的輔助治 療手段，逐漸被運(yùn)用于圍手術(shù)期二新輔助化療的 主要優(yōu)勢(shì)包括以下幾個(gè)方面：(1)降低腫瘤分期， 縮小腫瘤體積，提高手術(shù)切除率；(2)術(shù)前給藥能夠減少腫瘤組織血管及淋巴管，減少腫瘤細(xì)胞向血液系統(tǒng)及淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移，減少術(shù)后的復(fù)發(fā)和 轉(zhuǎn)移；(3)手術(shù)前控制腫瘤生長(zhǎng)，為手術(shù)準(zhǔn)備贏得時(shí)間；(4)減少術(shù)中癌細(xì)胞醫(yī)源性播散，使術(shù)中腫瘤細(xì)胞增殖能力處于低狀態(tài)或者滅活狀態(tài)。 大量臨床報(bào)道證實(shí)，術(shù)前行新輔助化療能夠降低 腫瘤局部復(fù)發(fā)率，提高患者生存率，對(duì)改善預(yù)后有著重要意義。腫瘤的發(fā)生是一個(gè)由遺傳、飲食 及環(huán)境等多種因素共同作用的結(jié)果，其中基因突 變?cè)谀[瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。CD44V6是 CD44的變異體，CD44V6在細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，腫瘤的發(fā)生、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移關(guān)系等生物學(xué)事件中發(fā)揮重要 作用。CD44V6通過(guò)其黏附功能，參與了腫瘤細(xì)胞 與血管或淋巴管內(nèi)皮之間、腫瘤細(xì)胞與基膜之間及腫瘤細(xì)胞穿出基膜與器官等腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的 過(guò)程，提高了腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力。
         研究 發(fā)現(xiàn)，CD44V6的陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤的惡性程度、 轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，而與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。有國(guó)外學(xué) 者報(bào)道，CD44V6與結(jié)腸癌腫瘤浸潤(rùn)深度及臨床分級(jí)密切相關(guān)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明CD44V6單抗能夠顯 著降低裸鼠大腸癌發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的概率。p21蛋白是一種重要的抑癌基因，p21蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖 中起非常重要的作用，通過(guò)阻止細(xì)胞由G，期進(jìn)入S期，抑制細(xì)胞增生發(fā)揮抗腫瘤作用。p21基因缺失， 失活等與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)[9-10]。 研究發(fā)現(xiàn)，p21的陽(yáng)性表達(dá)與預(yù)后呈正相關(guān)，與腫 瘤惡性程度、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，p21的表達(dá)減弱或消 失可能使抑制細(xì)胞增殖的作用減弱，或細(xì)胞正常 增生轉(zhuǎn)變?yōu)樵錾只涣?，?dǎo)致腫瘤發(fā)生的可能。 Ikeguchi等通過(guò)研究152例胃癌組織中p21蛋白的 表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)p21高表達(dá)與腫瘤分化類型、浸潤(rùn) 深度、淋巴結(jié)和肝臟轄移有關(guān)，p21陽(yáng)性表達(dá)的腫 瘤患者發(fā)生轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的概率小，且預(yù)后比較好 吳志明等‘141運(yùn)用RNA激活技術(shù)靶向上調(diào)p21基因表達(dá)，發(fā)現(xiàn)p21能夠抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)
胞凋亡，證實(shí)提高p21蛋白的表達(dá)可作為治療肝 細(xì)胞癌或其他惡性腫瘤的一種有效手段。

         因此，臨床上對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因CD44V6、p21蛋白表 達(dá)的監(jiān)測(cè)具有重要意義。對(duì)CD44V6、p21表達(dá)的 監(jiān)測(cè)對(duì)于判斷結(jié)直腸癌惡性程度、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，評(píng) 估患者預(yù)后以及選擇合理的治療方案有重要作用。 本研究中，觀察組新輔助化療患者癌細(xì)胞出 現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的發(fā)生率顯著低于對(duì)照組患者。觀察組患者化療前CD44V6的蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于化療后的表達(dá)水平，而觀察組患者化療前p21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于化療后，觀察組患者化療前后兩種蛋白的陽(yáng)性率差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 而對(duì)照組患者化療前后CD44V6、p21蛋白表達(dá)差 異不顯著=以上數(shù)據(jù)表明新輔助化療能夠有效降低結(jié)腸癌組織CD44V6表達(dá)，而提升結(jié)腸癌組織p21的表達(dá)．在一定程度上抑制了結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力．有利于結(jié)揚(yáng)癌患者的治療，對(duì)于結(jié)腸癌患者預(yù)后有顯著影響。 對(duì)兩組患者臨床資料對(duì)比 發(fā)現(xiàn)，治療組患者無(wú)論在淋巴結(jié)陽(yáng)性率、還是腫重的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率、生存率方面有均于對(duì)照組，提示術(shù)前預(yù)防性化療對(duì)提高結(jié)腸患者手術(shù)治療效果及生存率有積極的意義。值得提倡和推廣。然而也有學(xué)者對(duì)新輔助化療進(jìn)行質(zhì)疑，認(rèn)為新輔助化療會(huì)降低患者白細(xì)胞和血小板，減弱患者的免疫功能，從而增加了患者手術(shù)出血和感染的風(fēng)險(xiǎn)。 然而，隨著抗腫瘤藥物的研發(fā)及新配伍方案的應(yīng)用，有選擇地對(duì)患者采取個(gè)體化、安全化、有效 化的新輔助化療，將使結(jié)腸癌的治療效果進(jìn)一步 提高。

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         收稿日期：2015-03-04l
         （本文編輯：魏澤峰）