便血紅蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白聯(lián)合檢測(cè)在慢性腎衰 患者消化道病變?cè)\斷中的價(jià)值

        消化道出血是慢性腎衰患者常見(jiàn)并發(fā)癥之一，據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道其發(fā)病率為3%～7%[1]，尤其是接受血液透析的患者，晚期出血量大常成為持續(xù)性血透患者的重要死因。因此提早判斷慢性腎衰患者的消化道病變情況在臨床上尤為重要。目前常用內(nèi)鏡和隱血試驗(yàn)檢測(cè)消化道出血。其中隱血試驗(yàn)的常用方法是血紅蛋白(Hb)單克隆免疫法，血紅蛋白單克隆免疫法排除了動(dòng)物血和藥物氧化引起的假陽(yáng)性[2]，具有較高的靈敏度和特異性，但是Hb易于被胃腸道細(xì)菌分解或在黏膜消化酶作用下變性，亦或由于抗原抗體反應(yīng)的后帶現(xiàn)象，而出現(xiàn)假陰性。因此，單純利用血紅蛋白(Hb)單克隆抗體試驗(yàn)不能良好地反映慢性腎衰患者消化道出血情況。有報(bào)道指出，聯(lián)合應(yīng)用便轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)免疫法對(duì)消化道病變的診斷具有較高的應(yīng)用價(jià)值[3]。本研究探討了便Hb和Tf聯(lián)合檢測(cè)在慢性腎衰患者消化道病變?cè)\斷中的價(jià)值。

        1　資料與方法

        1.1　一般資料　隨機(jī)選取472例本院住院及門(mén)診慢性腎功能衰竭患者送檢的糞便標(biāo)本(慢性腎功能衰竭組)，患者平均年齡為(58.7±12.6)歲，男性258例，女性214例，其中經(jīng)內(nèi)窺鏡確診慢性腎衰伴上消化道出血225例、伴下消化道出血202 例、慢性腎衰但無(wú)消化道出血癥狀45例。本院體檢且無(wú)明確病史的健康成人100例作為健康對(duì)照組，平均年齡為(52.4±8.2)歲，其中男性64例，女性36例，經(jīng)詢問(wèn)該組人員均無(wú)肝、腎、肺部及心腦血管病史，內(nèi)窺鏡檢查無(wú)任何消化道病變。

        1.2　試劑　便Hb和Tf免疫法檢測(cè)試劑為消康保便隱血免疫雙聯(lián)檢測(cè)卡，購(gòu)自萬(wàn)華普曼生物工程有限公司，生產(chǎn)批號(hào)為13092060。

        1.3　方法　用采便棒在糞便6個(gè)不同位置進(jìn)行收集后放入裝有稀釋液的采便器中，充分混勻便樣，在檢測(cè)板的2個(gè)滴孔中分別滴入3滴糞便混懸液，5min內(nèi)觀察結(jié)果。Hb檢測(cè)時(shí)，質(zhì)控區(qū)C 和Hb檢測(cè)區(qū)出現(xiàn)紫紅色帶，為Hb陽(yáng)性;Tf檢測(cè)時(shí)，質(zhì)控區(qū)C 和Tf檢測(cè)區(qū)出現(xiàn)紫紅色帶，為T(mén)f陽(yáng)性;聯(lián)合檢測(cè)時(shí)質(zhì)控區(qū)C 陽(yáng)性、Hb檢測(cè)區(qū)和Tf檢測(cè)區(qū)只要有一區(qū)出現(xiàn)陽(yáng)性，即為陽(yáng)性;僅在質(zhì)控區(qū)C 出現(xiàn)條帶為陰性。如5 min內(nèi)，質(zhì)控區(qū)C 未出現(xiàn)條帶，則表明試劑失效，需重新實(shí)驗(yàn)。

        1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理　采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)數(shù)資料以百分率形式表示，采用χ 2 檢驗(yàn)。以p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2　結(jié)　　果

        2.1　各組糞便轉(zhuǎn)鐵蛋白與血紅蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性率比較
 

        2.2　血紅蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白檢測(cè)結(jié)果　見(jiàn)表2，經(jīng)χ 2 檢驗(yàn)比較，血紅蛋白檢測(cè)法和轉(zhuǎn)鐵蛋白檢測(cè)法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ 2=13.46，p<0.05)。

        2.3　血紅蛋白試驗(yàn)與聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果　見(jiàn)表3，經(jīng)χ 2 檢驗(yàn)，血紅蛋白檢測(cè)法與聯(lián)合檢測(cè)法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ 2=126，p<0.05)。

        2.4　轉(zhuǎn)鐵蛋白試驗(yàn)與聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果　見(jiàn)表4，經(jīng)χ 2 檢驗(yàn)，轉(zhuǎn)鐵蛋白檢測(cè)法與聯(lián)合檢測(cè)法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ 2=54.018， p<0.05)。

        3　討　　論慢性腎功能衰竭合并消化道出血在臨床上較常見(jiàn)，尤其是長(zhǎng)期血液透析患者，如伴隨大量出血常可致命，因此對(duì)于慢性腎衰患者消化道病變的早期發(fā)現(xiàn)顯得尤為重要。在臨床上內(nèi)窺鏡檢查和隱血試驗(yàn)為消化道出血的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但是內(nèi)窺鏡檢查需要一定的前期準(zhǔn)備，且成本高，屬于有創(chuàng)操作。相比之下，糞便潛血試驗(yàn)的標(biāo)本留取方便，試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單，成本低，并且具有較高的靈敏度和特異性。目前試驗(yàn)常用Hb和Tf免疫法，該方法利用了雙抗體夾心檢測(cè)原理。采用特異的人Hb或Tf單抗包被于纖維素膜上，特異地與糞便中人的Hb或Tf結(jié)合，再利用膠體金標(biāo)記的抗人Hb或抗人Tf抗體顯色測(cè)定[4]，這樣只特異性的針對(duì)Hb或Tf抗原表位，因此免疫法具有很高的靈敏度和特異性，Hb檢測(cè)限為0.2μg/mL，Tf檢測(cè)限為40ng/mL。慢性腎衰患者肌酐和尿素氮均高出正常水平很多，大量尿毒素經(jīng)消化道排出，在細(xì)菌或胃腸道水解酶作用下產(chǎn)生的氨類物質(zhì)增多，從而刺激胃腸黏膜出現(xiàn)炎癥和潰瘍，進(jìn)而出血[5]。若出血后血紅蛋白在消化道內(nèi)存留時(shí)間較長(zhǎng)，由于腸道細(xì)菌的分解及胃腸黏膜分泌的消化酶作用，血紅蛋白被充分降解失去與單克隆抗體特異性結(jié)合的抗原決定簇，而導(dǎo)致血紅蛋白單克隆免疫法出現(xiàn)假陰性[6]。另外，慢性腎衰患者易出現(xiàn)血小板功能障礙、血管壁硬化、代謝性酸中毒，致使血管脆性增加，而血液透析時(shí)抗凝藥物的使用，又加劇了機(jī)體凝血功能的異常，這些原因都可使消化道出血量增加[7]。當(dāng)患者上消化道大量出血或出現(xiàn)柏油樣便時(shí)，Hb濃度常超出2000μg/mL 的檢測(cè)限范圍，這時(shí)血紅蛋白作為抗原是過(guò)量的，它會(huì)與HbHb抗體復(fù)合物競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合測(cè)試區(qū)上的抗Hb，出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)中的后帶現(xiàn)象，這也導(dǎo)致血紅蛋白單克隆免疫法出現(xiàn)假陰性。Tf是一種β1球蛋白，主要在人體的肝臟內(nèi)合成，存在于血漿中，在健康人的糞便中幾乎不存在。在消化道出血時(shí)，血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白也會(huì)進(jìn)入胃腸道，但是其在腸道內(nèi)的穩(wěn)定性及抗菌能力都強(qiáng)于血紅蛋白，它不易被胃酸、細(xì)菌降解消化[8]，可以在糞便中穩(wěn)定存在，因此Tf彌補(bǔ)了Hb在穩(wěn)定性方面的不足，減少了假陰性的發(fā)生，成為更為敏感的檢測(cè)指標(biāo)，可以提早發(fā)現(xiàn)慢性腎衰患者消化道病變情況。但一些研究資料中顯示，臨床上約有10%的病例出現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白值較低的現(xiàn)象，如遺傳性無(wú)轉(zhuǎn)鐵蛋白血癥[9]，另外，由于轉(zhuǎn)鐵蛋白為負(fù)性急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，因此在手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染等各種以炎癥反應(yīng)為主的疾病中，轉(zhuǎn)鐵蛋白含量降低[10]，此時(shí)轉(zhuǎn)鐵蛋白法檢測(cè)結(jié)果會(huì)出現(xiàn)陰性，故單獨(dú)檢測(cè)Tf也會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果中還顯示，在慢性腎衰無(wú)消化道出血組45 例標(biāo)本中，血紅蛋白試驗(yàn)、轉(zhuǎn)鐵蛋白試驗(yàn)及聯(lián)合檢測(cè)法均出現(xiàn)了陽(yáng)性結(jié)果，而健康對(duì)照組100例標(biāo)本中僅有1例陽(yáng)性結(jié)果，可能是由于某些患者消化道出血部位隱藏在黏膜褶皺內(nèi)或出血量小，而不易通過(guò)內(nèi)鏡檢查發(fā)現(xiàn)，但血卻已通過(guò)消化道隨糞便排出體外，因此血紅蛋白試驗(yàn)、轉(zhuǎn)鐵蛋白試驗(yàn)以及聯(lián)合檢測(cè)均出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。綜上所述，在判斷慢性腎功能衰竭合并消化道出血方面，單一的隱血試驗(yàn)方法是不全面的。而Hb和Tf聯(lián)合檢測(cè)法降低了假陰性出現(xiàn)的概率，具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。因此，在實(shí)際工作中應(yīng)運(yùn)用免疫雙聯(lián)檢測(cè)法，同時(shí)及時(shí)與臨床醫(yī)生溝通，結(jié)合標(biāo)本性狀具體分析，并根據(jù)其他篩查指標(biāo)，如胃腸鏡、X 線等，分析判別其造成假陰、陽(yáng)性的原因，以提高慢性腎衰并發(fā)消化道出血診斷的準(zhǔn)確性，以便進(jìn)行早期干預(yù)，早期治療，提高慢性腎衰患者生活質(zhì)量。

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        (收稿日期：20131208)