凝血抗凝、纖溶功能聯(lián)合檢測的應用與臨床意義

作者：劉開琴,李智山,張勤,任瑞平　　作者單位：1襄樊市中心醫(yī)院檢驗科 襄樊 441021 2襄樊市人民醫(yī)院檢驗科 3華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院

　　【摘要】目的探討凝血抗凝、纖溶功能聯(lián)合檢測對血栓或出血性疾病的診斷意義。方法 選用反應凝血抗凝、纖溶功能的代表性指標如凝血因子Ⅷ(FⅧ)、抗凝血酶活性(AT：A)、D二聚體(DD)等，對不同的臨床病例進行了檢測、分析。結果 DIC、疑似DIC組、高凝傾向組AT:A、DD等改變與對照組比較差異均有顯著性(P<0.05、P<0.001),同時DIC組、疑似DIC組FⅧ改變與對照組比較差異均有顯著性(P<0.001);各疾病組間各檢測指標的異常率也有不同程度的差異。結論 聯(lián)合檢測能夠較全面地了解患者的凝血、抗凝、纖維蛋白溶解功能改變，對于血栓性或出血性疾病的診斷及鑒別診斷有指導意義。

　　【關鍵詞】 凝血功能,纖維蛋白溶解,出血與血栓性疾病

　　目前國內(nèi)對血栓或出血性疾病的常規(guī)檢測多注重凝血功能的改變，對凝血、抗凝、纖維蛋白溶解功能(纖溶)進行綜合性檢測以全面了解受檢者的狀況尚顯不足。為此，本文選擇了部分有代表性的檢測指標，對健康正常人、部分臨床病例進行測定并進行了綜合性分析，以求為臨床提供更全面的實驗室資料。

　　1 資料和方法

　　1.1 研究對象 健康正常人68例，男28例，女40例，年齡8～77歲，中位年齡45.8歲，清晨空腹采血，檢測前均未服用與凝血、抗凝、纖溶有關的藥物。受檢病例均為漢口協(xié)和醫(yī)院2005～2006年住院或門診患者，共71例，年齡1～82歲，中位年齡36.5歲。資料分為對照組(健康正常人)68例，彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)組23例，所有病例DIC診斷符合2000年制定的標準[1];疑似DIC組20例為聯(lián)合檢測異常指標≤3項者，高凝傾向組17例為纖維蛋白原(Fbg)增高，聯(lián)合檢測異常指標≤2項者;血友病組為甲型10例，乙型1例，診斷標準見參考文獻[2]。

　　1.2 檢測方法

　　1.2.1 一期法凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)檢測，抗凝血酶活性(AT:A)測定(發(fā)色底物法)，活化部分凝血活酶試驗(aPTT)，凝血酶原時間(PT)測定，纖維蛋白原定量(Fbg)，D二聚體(DD)定量[3]。試劑由DADEBEHRING公司提供，實驗步驟參照說明書。魚精蛋白副凝固試驗(3P)應用1%魚精蛋白注射液，由上海藥業(yè)生化有限公司提供。

　　1.2.2 儀器 日產(chǎn)CA7000全自動血凝儀，Eppendorf 581 0R低溫離心機。

　　1.2.3 標本處理 全血與109 mmol/L枸櫞酸鈉9∶1比例抗凝，1 h內(nèi)3 500 r/min離心6 min，取上層乏血小板血漿(PPP)，3 h內(nèi)測定或-20℃保存不超過1周。

　　1.2.4 統(tǒng)計學處理 應用Exse 2003l軟件t檢驗處理，以P<0.05為差異有顯著意義。

　　2 結 果

　　2.1 應用上述實驗指標檢測各受檢組結果 見表1。 表1 各受檢組結果及比較表示高凝組與疑似DIC組、DIC組比較P<0.05.▲▲P<0.001

　　由表1可見FⅧ、AT:A、Fbg、DD,在DIC、疑DIC組與對照組差異有顯著性，兩疾病組間DD差異有顯著意義;高凝組FⅧ、AT:A、Fbg、DD均較正常組增高;血友病組FⅧ、aPTT與其他各組差異有顯著性;

　　2.2 各受檢組異常率比較，見表2。 表2 各受檢組異常率比較

　　3 討 論

　　凝血抗凝、纖溶是人體重要生理平衡機制，其間有非常復雜的聯(lián)系，人體發(fā)生疾病可引起連鎖的病理反應，因此對上述生理功能的全面了解在疾病的診斷、發(fā)生、發(fā)展、治療監(jiān)測，預后評價上都有至關重要的意義。

　　3.1 凝血功能檢測的意義 血栓與出血性疾病的發(fā)生多由凝血異常所致，多因感染、損傷、腫瘤細胞侵襲等因素導致血管內(nèi)皮的損傷而啟動，進而導致一系列病理反應。aPTT是內(nèi)源性凝血途徑的過篩試驗，參入內(nèi)源凝血任一因子或抑制物的異常往往會引起該實驗時間延長或縮短，F(xiàn)Ⅷ是內(nèi)源途徑的重要因子之一，在出血或血栓性疾病有較明顯的改變。血友病A、血管性血友病均以FⅧ水平明顯缺乏或降低為特征。DIC病例往往表現(xiàn)為消耗性凝血病，在疾病的早、中期主要表現(xiàn)為凝血功能的明顯改變。本資料顯示，DIC組病例表現(xiàn)有諸多凝血指標的明顯異常如FⅧ、aPTT、Fbg的異常，疑似DIC組也表現(xiàn)有同樣的異常，且有明顯程度上的差別如FⅧ、aPTT、Fbg，同時在DIC、高凝狀態(tài)組有FⅧ水平增高(9.0%、6.0%)，主要是因為凝血酶活化了FⅧ所致。在血友病組可見其異常表現(xiàn)是FⅧ嚴重減低，aPTT明顯延長，PT均正常(資料未顯示)，這也是診斷血友病的重要依據(jù)之一。

　　3.2 抗凝血功能檢測的意義 AT屬絲氨酸蛋白酶抑制劑，除有抗FⅡa和FXa作用外,對FⅨa、FⅪa、FⅫa等都有抑制作用;AT占血漿中抗凝活性的70%以上，其主要合成部位在肝臟，內(nèi)皮細胞亦有部分合成。故各類肝病致肝功能受損時，AT呈獲得性減少[4]。在生理條件下,AT與肝素結合后可抑制凝血酶的活性,并使凝血因子Ⅱa、Ⅶ、Ⅳa、Ⅴa滅活。在病理條件下,血漿AT的缺乏可導致血栓的形成，有學者報道[5]，AT在早期DIC的陽性率為93.8%,而在DIC中晚期，因凝血酶生成障礙,使其消耗減少，陽性率有所下降。本資料顯示DIC、疑似DIC、高凝狀態(tài)AT:A減低的陽性率分別是52.2%、55.0%、11.8%，DIC、高凝狀態(tài)組各有3例增高(13.0%和17.6%)，提示在疑似DIC病例AT:A降低似更明顯。

　　3.3 纖維蛋白溶解功能檢測的意義 病理性纖溶多發(fā)生在凝血激活以后，激活的凝血因子，凝血酶可經(jīng)多種途徑激活血漿纖溶酶原轉變?yōu)槔w溶酶，進而溶解纖維蛋白，這也是人體的重要保護機制。DD是纖維蛋白形成后溶解的特異性降解產(chǎn)物，是繼發(fā)性纖溶的重要證據(jù)，3P實驗是檢測纖維蛋白單體與纖維蛋白降解產(chǎn)物復合物的一項特異性指標。本研究顯示，DIC、疑似DIC、高凝狀態(tài)、疑似DIC組DD陽性率分別為87.0%、35.0%、15.0%，表明3組纖溶活性在程度上有明顯差異。DIC組多進入纖溶亢進期，高凝狀態(tài)組表現(xiàn)為高凝、高纖溶狀態(tài)，疑似DIC組則處在相對平衡狀態(tài);Fbg是凝血反應的中心蛋白，其增高是血栓性疾病發(fā)生的獨立危險因素之一，DIC病例以減低表現(xiàn)為主，其原因一是凝血消耗，二是由于纖溶酶對Fbg的水解;高凝狀態(tài)Fbg明顯增高，血友病患者也常增高(27.0%)，其原因可能是因為凝血活酶生成減少Fbg消耗減低所致。

　　3.4 凝血抗凝、纖溶功能聯(lián)合檢測的臨床意義 人體生理功能是一完整的平衡狀態(tài)，其改變牽一發(fā)動全身，凝血激活可同時激活抗凝和纖溶，DIC病程的發(fā)生和發(fā)展是一典型的表現(xiàn)。本資料顯示，DIC病例在凝血、抗凝、纖溶等方面均有明顯的異常改變，多數(shù)指標的陽性率明顯高于其他組。疑似DIC組則主要表現(xiàn)為凝血抗凝因子的降低，如AT:A、FⅧ、Fbg減低。高凝傾向組主要表現(xiàn)為Fbg增高，纖維單體復合物增多，纖溶活性增強(表2)。血友病則主要表現(xiàn)為凝血因子的缺損，而且以缺乏FⅧ的血友病甲為主(10/11)。綜上所述，凝血抗凝、纖溶功能聯(lián)合檢測，明顯優(yōu)于僅單一功能的檢測，可為臨床提供較為全面的實驗數(shù)據(jù)，在血栓或出血性疾病的診斷中具有參考價值。