【摘要】 目的 探討自動化尿分析儀在胸腹水檢測中的臨床應(yīng)用。方法 隨機收集本院門診和住院病人送檢胸腹水標(biāo)本68份,在優(yōu)利特-300尿干化學(xué)分析儀上測定其蛋白含量和比重,在UF-1000i全自動尿沉渣分析儀上測定其紅細胞、白細胞數(shù)、上皮細胞數(shù),與手工檢測結(jié)果比較。結(jié)果 優(yōu)利特-300與手工法比較,檢測結(jié)果采用x2檢驗,蛋白含量及比重均有極顯著差異(P <0.01);UF-1000i全自動尿沉渣分析儀與手工法比較,檢測結(jié)果采用配對t 檢驗,紅細胞數(shù)無顯著性差異(P >0.05),白細胞數(shù)有顯著性差異(P <0.05)。結(jié)論 優(yōu)利特-300不能用于檢測胸腹水蛋白含量及比重;UF-1000i可用于檢測胸腹水中紅細胞數(shù),但不能用于檢測其白細胞數(shù),上皮細胞數(shù)可作為是否進行細胞分類以及脫落細胞學(xué)檢查的參考指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】 胸腹水 優(yōu)利特300 UF-1000i 手工法 結(jié)果比較
目前漿膜腔積液細胞檢查仍為傳統(tǒng)的顯微鏡下直接細胞計數(shù)、分類檢測、但是此方法對結(jié)果的影響因素較多,難以快速、客觀、準(zhǔn)確的取得實驗結(jié)果。因此,有醫(yī)學(xué)工作者試圖將全自動尿沉渣分析儀用于胸腹腔積液細胞計數(shù),但不同報道結(jié)果有很大差別,為了證實我院引進一年UF-1000i在胸腹水檢測中的應(yīng)用價值,以及優(yōu)利特-300尿干化學(xué)分析儀測定胸腹水中蛋白含量和比重,我們收集胸腹水標(biāo)本68例進行檢測分析,并和手工法比較,現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 標(biāo)本來源 隨機收集本院門診和住院病人送檢胸腹水標(biāo)本,共68例,其中女性30例,男性38例。采集后不加抗凝劑立即送檢,30min內(nèi)檢測完畢。
1.2 儀器 UF-1000i(日本Sysmex公司);尿十一項干化學(xué)分析儀(桂林優(yōu)利特-300);配套試劑和原裝質(zhì)控品;OLYPASX-31顯微鏡;標(biāo)準(zhǔn)牛鮑氏計數(shù)板。
1.3 方法
1.3.1 每份標(biāo)本同時用優(yōu)利特-300和手動法檢測蛋白含量和比重。
1.3.2 每份標(biāo)本同時用UF-1000i和手工法檢測紅細胞、白細胞、上皮細胞數(shù)量。當(dāng)白細胞計數(shù)>300×106/L的標(biāo)本,2000r/min離心3min,收集細胞做形態(tài)學(xué)分類(瑞氏染色)。
1.3.3 UF-1000i和優(yōu)利特-300的操作說明按照儀器說明書進行,手工檢測方法按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行,蛋白質(zhì)和比重結(jié)果的統(tǒng)計分析采用x2檢驗,細胞計數(shù)結(jié)果的統(tǒng)計分析采用配對t 檢驗。
2 結(jié)果
2.1 優(yōu)利特-300與手工法分別測定68例胸腹水的蛋白質(zhì)、比重和pH值,經(jīng)x2檢驗,蛋白質(zhì)含量和比重均有極顯著差異(x2=106、17,p<0.01、p<0.01)。68例胸腹水的pH值均大于7.5。結(jié)果見表1。
表1 優(yōu)利特-300與手工法測定胸腹水的蛋白質(zhì)、比重結(jié)果的比較
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2.2 UF-1000i和光鏡同時計數(shù)胸腹水中紅細胞、白細胞、經(jīng)配對t 檢驗,紅細胞數(shù)兩者有顯著性差異(t =1.78,p>0.05),白細胞數(shù)兩者有顯著性差異(t =5.92,p<0.05)。
2.3 UF-1000i檢出上皮細胞數(shù)>10/μL者,白細胞數(shù)均>300×106/L,共26例,經(jīng)2000r/min離心3min取沉淀涂片瑞氏染色,油鏡下手工分類計數(shù),結(jié)果見表2.
表2 UF-1000i與手工計數(shù)上皮細胞結(jié)果比較
UF-1000i 手工
EC(μL) 間皮細胞()
<20 1~6
20~50 10~20
>50 >20
3 討 論
優(yōu)利特-300是專為尿液分析設(shè)計的,特異性很高,其蛋白質(zhì)的檢測是根據(jù)染料結(jié)合的蛋白誤差法原理,高出pH值會使燃料本身顏色加深,造成假陽性,加之胸腹水中所含蛋白組分與尿液中有較大差別,也是造成檢測結(jié)果差異的原因之一;而比重的測定則是利用尿中電解質(zhì)與聚電解質(zhì)發(fā)生離子交換的原理,在高pH值的情況下,測定結(jié)果將偏低。正常人的新鮮尿pH值在5~7之間,本文用優(yōu)利特-300測定出的68份胸腹水值均大于7.5,勢必造成蛋白質(zhì)出現(xiàn)假陽性以及比重偏低,與手工法比較其P <0.01,結(jié)果統(tǒng)計學(xué)有極顯著性差異,因此,優(yōu)利特-300不能用于檢測胸腹水蛋白質(zhì)含量和比重。
UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀應(yīng)用流式細胞和電阻抗原理[1],通過測定各種有形成份的熒光強度(F1)和熒光脈沖寬度(F1w)、前向散射光強度(Fsc)和前向散射光脈沖寬度(Fscw)以及電阻抗的大小(lmp),識別和計數(shù)標(biāo)本中各種有形成分,如紅細胞、白細胞、上皮細胞等。標(biāo)本可自動混勻,消除了離心沉淀法的體積計算不準(zhǔn),細胞成分附壁,細胞沉淀易破環(huán)變形等影響因素,其結(jié)果客觀可靠。儀器可在相當(dāng)大的范圍內(nèi)對紅細胞、白細胞等進行準(zhǔn)確計數(shù),作出定量報告。本文用UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀及手工法同時對68例胸腹水進行紅細胞、白細胞的計數(shù),兩法檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,紅細胞數(shù)無顯著性差異(P >0.05),而白細胞數(shù)有顯著性差異(p<0.05),這是由于胸腹水的特殊性造成的,與新鮮尿液相比,胸腹水在體內(nèi)停留時間較長,其中的白細胞會發(fā)生聚集、溶解、變性等,而且胸腹水中可能有較多的脫落的上皮細胞,甚至是腫瘤細胞,都會對UF-1000i計數(shù)的白細胞數(shù)產(chǎn)生影響,因此,UF-1000i可以用于檢測胸腹水中的紅細胞數(shù),不能檢測其中的白細胞數(shù)。
對于血性胸腹水,因其所含紅細胞數(shù)量較多,臨床上一般以“++ — ++++”/HP報告,沒有給出準(zhǔn)確的計數(shù)結(jié)果。UF-1000i檢測結(jié)果與手工計數(shù)紅細胞無顯著性差異(P >0.05),可用于檢測紅細胞數(shù),但鑒于成本過高,不提倡采用。在某些特殊情況下,如果確實需要,可使用UF-1000i得到精確的紅細胞計數(shù)結(jié)果。
由表2可知,UF-1000i檢出上皮細胞增多(大于20/μL)胸腹水,經(jīng)離心沉淀、瑞氏染色、油鏡下手工分類計數(shù)得出的間皮細胞百分比與上皮細胞數(shù)具有相關(guān)性,當(dāng)間皮細胞百分比>20%時,上皮細胞數(shù)均>50/μL,而間皮細胞百分比>20%時是臨床上疑為腫瘤的一個重要依據(jù)。譚家成[2]用UF-100檢出上皮細胞(EC)和/或小圓上皮細胞(SRC)增高的腦脊液,經(jīng)脫落細胞學(xué)檢查證實為腫瘤細胞。因此,若UF-1000i檢測胸腹水的上皮細胞數(shù)>50/μL,可作為進行細胞分類以及脫落細胞學(xué)檢查的參考指標(biāo)。
曾有文獻報道[3]UF-100全自動尿沉渣分析儀可用于胸腹水的檢查,但本試驗結(jié)果表明UF-1000i只能用于檢測胸腹水中的紅細胞數(shù)量,不能用于檢測其中的白細胞數(shù)量,與其結(jié)論不符。
綜合本文試驗結(jié)果,我們認(rèn)為胸腹水的檢測目前仍以手工法為宜。
參 考 文 獻
[1]從玉隆,馬俊龍. 當(dāng)代尿液分析技術(shù)與臨床[M].版,北京:中國科學(xué)技術(shù)出版,2000;15-35.
[2]譚家成,朱田娣. UF-100全自動尿沉渣分析儀在腦脊液檢查中的應(yīng)用[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗,2003;10(5):403.
[3]魏 明.UF-100全自動尿沉渣分析儀在胸腹水檢查中的應(yīng)用[J]. 江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2004,44(5):107.