細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的利器——雙熒光素酶報告基因檢測
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)檢測
細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)（抑制或增強）
目的蛋白對已知蛋白的調(diào)控
啟動子/增強子檢測
病毒/細(xì)胞相互作用
轉(zhuǎn)錄因子(IFN ? -NF-KB,IRF3)
藥物誘導(dǎo)作用或效果
各種射線處理對細(xì)胞因子的調(diào)控研究
傳統(tǒng)檢測方法——WB
SCI文章必備數(shù)據(jù)（IF>3,調(diào)節(jié)功能研究）。
Western blotting 得到結(jié)果所需時間太久.
操作過程繁瑣，并且需要使用比較昂貴的抗體.
WB結(jié)果缺乏統(tǒng)計學(xué)依據(jù)。
人為影響因素太大
熒光素酶報告基因的優(yōu)點
優(yōu)越的靈敏度，比Westernbloting靈敏度高1000倍以上。
具有可靠的統(tǒng)計學(xué)原理，每組實驗重復(fù)三次。
高信號值，無內(nèi)源活性。
目前主流檢測方法。
檢測快，靈敏度高。
我們并不放棄WB檢測，在熒光素酶檢測后，樣品在進行WB檢測，使實驗更具有說服力。
使用范圍廣，可檢測細(xì)胞內(nèi)任何分子。
熒光素酶報告基因的檢測原理
原理：制備含有Luc/Rluc的DNA載體，進行過表達(dá)細(xì)胞株。
細(xì)胞選擇：根據(jù)實驗需要選擇細(xì)胞株，通常選擇轉(zhuǎn)染效率較高的293T,Hela細(xì)胞及原代細(xì)胞等。
轉(zhuǎn)染：將帶有熒光素酶標(biāo)記的報告基因和目的基因進行過表達(dá) (不同時間點) .
提供刺激：一般為藥物處理，病毒感染，紫外照射等各種條件刺激。
蛋白收集：采用進口/國產(chǎn)試劑盒（Promega，invitrigen，尚柏生物）進行收集，實驗重復(fù)三次。
測量熒光：Modulus™ 單管型多功能熒光計 進行檢測。
結(jié)果分析
服務(wù)內(nèi)容：
1.我們提供IFN-Luc，IFN-Luc，ISRE-Luc，PRDII-Luc，ERSE-Luc，UPRE-Luc，NF-KB-Luc雙熒光素標(biāo)記的報告基因，可對IFN-α, IFN- β, IRF3, NF-KB等通路檢測。
2.我們提供常見表達(dá)細(xì)胞：293T,Hela及常見的原代細(xì)胞等。
3.客戶只需根據(jù)實驗需要提供目的基因、熒光素標(biāo)記的報告基因、表達(dá)細(xì)胞即可。
4.我們提供真實的原始數(shù)據(jù)，結(jié)果分析報告。
