打破“毒乳腺癌”免疫耐受的治療靶點

本研究中，研究人員研究了CD84在三陰性乳腺癌中對TME的調(diào)控作用。研究人員證明，CD84在breg中誘導(dǎo)了涉及β-catenin和Tcf4通路的級聯(lián)反應(yīng)，后者通過與白細胞介素-10的啟動子及其調(diào)節(jié)因子AhR的啟動子結(jié)合來誘導(dǎo)白細胞介素-10的轉(zhuǎn)錄。這導(dǎo)致了Bregs的擴增，進而控制其他免疫細胞的活性和免疫抑制。因此，研究人員建議將CD84作為打破三陰性乳腺癌免疫耐受的治療靶點。

背景信息

01

乳腺癌（BC）是全球女性常見的惡性腫瘤。雖然早期乳腺癌在70%-80%的病例中可以治，但晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌缺乏可治的治療方案。BC是由不同亞型組成的異質(zhì)性疾病。雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）和人表皮生長因子受體2 （HER2）表達陰性的乳腺癌被認(rèn)為是三陰性乳腺癌（TNBC），是具侵襲性的乳腺癌亞型，占新診斷乳腺癌的15% ~ 20%。由于缺乏獨特的細胞表面標(biāo)志物表達，對這些腫瘤細胞進行靶向治療極為困難。因此，TNBC對更好的治療方案的需求尚未得到滿足。

TNBC的腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment， TME）在塑造疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。在腫瘤發(fā)生的早期階段，免疫微環(huán)境（ME）發(fā)揮抗腫瘤作用，隨著疾病的進展和腫瘤的侵襲性，其發(fā)展為免疫逃避機制，ME成為促腫瘤作用。TNBC誘導(dǎo)有效的機制降低免疫識別，促進強烈的免疫抑制。在TNBC的TME中，T細胞表現(xiàn)出功能失調(diào)的效應(yīng)狀態(tài)，其特征是白細胞介素-2 （IL-2）、腫瘤壞死因子（TNF）的分泌減少，以及抑制性受體（也稱為耗竭標(biāo)志物）的高表達。除了“耗竭”T細胞，TME的特征還包括存在的調(diào)節(jié)性T細胞（Tregs）和髓源性抑制細胞（MDSCs），后者是一種未成熟的髓系細胞，能夠抑制T細胞、樹突狀細胞（DCs）和自然殺傷（NK）細胞的抗腫瘤活性。

調(diào)節(jié)性B細胞（Bregs）是近年來出現(xiàn)的一種免疫抑制細胞群，是BC進展的主要促成因素。breg是具有調(diào)節(jié)特性的B細胞，通過釋放其標(biāo)志性細胞因子IL-10來發(fā)揮其活性。它們響應(yīng)來自TME的信號而產(chǎn)生，進而通過與TME中的細胞相互作用和與腫瘤細胞直接相互作用促進腫瘤生長。為了開發(fā)它們的治療潛力，了解Bregs的生物學(xué)和識別誘導(dǎo)它們分化的信號是必要的。

CD84 正向調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中耐受性免疫細胞的積累，從而促進三陰性乳腺癌的進展

02

在人類樣本中CD84的表達提示這種受體在TNBC的ME中發(fā)揮作用。因此，研究人員接下來在小鼠模型中研究其在疾病進展中的作用機制。為了確定CD84在小鼠TNBC的發(fā)生和進展中是否發(fā)揮作用，并追蹤惡性細胞與其TME之間的相互作用，研究人員首先評估了E0771細胞（小鼠TNBC細胞系）中的CD84表達情況。為此，研究人員通過實時qPCR確定了E0771細胞中CD84的mRNA表達水平。結(jié)果顯示，E0771細胞幾乎不表達CD84 mRNA，而通過siCD84抑制其表達幾乎不會對其已很低的表達水平產(chǎn)生影響。接下來，研究人員確定了E0771細胞中的CD84蛋白水平，并將其與表達高水平CD84的TCL-1細胞（小鼠CLL模型）進行了比較。結(jié)果顯示，與TCL-1衍生細胞相比，E0771細胞中CD84的表達水平極低。

接下來，為了確定細胞表面CD84在它們體內(nèi)的ME中的作用，研究人員將E0771細胞注射到野生型或CD84缺乏小鼠體內(nèi)。在第14和21天時，測量并記錄腫瘤體積。在第21天時，分析來自TME的細胞，以確定免疫抑制細胞（包括MDSCs、Bregs、T細胞、CD84和耗竭標(biāo)記表達）的積累情況。與CD84敲除小鼠相比，WT小鼠的腫瘤明顯更大。此外，盡管E0771癌細胞幾乎不表達細胞表面CD84，但它們周圍的TME中的免疫細胞表達的這種受體水平高于脾臟免疫細胞的表達水平，這表明腫瘤細胞觸發(fā)了其ME中CD84表達的升高。對TME中免疫亞群的詳細分析顯示，在缺乏CD84的情況下，腫瘤ME中積累的G-MDSC和M-MDSC的百分比和數(shù)量以及M-MDSC中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達水平降低。另外，WT ME中B細胞產(chǎn)生的Breg的比例和數(shù)量較高。在CD84敲除和野生型小鼠的腫瘤ME中檢測到相似比例的CD4和CD8 T細胞，但來自CD84缺乏環(huán)境的CD8 T細胞顯示出降低的耗竭標(biāo)記表達。由于在健康的CD84敲除小鼠中與健康的野生型小鼠相比沒有出現(xiàn)免疫抑制細胞（如Bregs）的穩(wěn)態(tài)丟失，這些結(jié)果表明在小鼠中CD84表達與TNBC疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。此外，CD84的缺失導(dǎo)致抗腫瘤免疫反應(yīng)的更高效性和腫瘤生長的抑制。

結(jié)論

03

綜合研究結(jié)果表明，CD84在調(diào)節(jié)TNBC的免疫抑制中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。研究人員推測，癌細胞通過CD84支持其微環(huán)境中Tregs、MDSCs和Bregs等耐受性免疫細胞的積累。反過來，這些細胞為癌細胞提供了對抗抗腫瘤免疫反應(yīng)的保護，使它們得以生存和增殖。因此，CD84可作為打破免疫耐受的治療靶點。在TNBC患者中阻斷其活性可能導(dǎo)致抗腫瘤免疫能力的增強，從而抑制腫瘤的進展。