研究成果助力系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床診療

近日，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院風(fēng)濕科沈南教授和中-澳個(gè)體化免疫學(xué)聯(lián)合研究中心卡羅拉·維努埃薩（Carola  Vinuesa）教授團(tuán)隊(duì)在國際期刊Science發(fā)表題為The transc[x]riptional factor ZEB2 drives the formation of age-associated B cells的研究論文。該研究首揭示了轉(zhuǎn)錄因子ZEB2對狼瘡致病性B細(xì)胞新亞群ABC細(xì)胞譜系特化的調(diào)控功能和機(jī)制，為自身免疫疾病的發(fā)病機(jī)制提供了深刻的見解，有助于開發(fā)更有效的治療手段和方案。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是自身免疫疾病的原型，其特征為自身反應(yīng)性B細(xì)胞的過度活化和自身抗體的大量產(chǎn)生，并伴隨全身性的免疫系統(tǒng)紊亂以及靶組織炎癥損傷。當(dāng)前針對B細(xì)胞的治療手段主要包括單抗類藥物和靶向B細(xì)胞重要通路的抑制劑分子藥物，而這些治療方法往往攻擊整體B細(xì)胞群，可能會(huì)出現(xiàn)兩類問題，一是由于保護(hù)性的B細(xì)胞被清除，病人容易出現(xiàn)感染等副反應(yīng)；二是缺乏精的治療范圍，致病性B細(xì)胞的靶向效率下降，不能深度清除B細(xì)胞，導(dǎo)致部分患者對藥物的反應(yīng)不強(qiáng)，長期預(yù)后不佳。因此，鑒定系統(tǒng)性紅斑狼瘡中致病性的B細(xì)胞亞群，并尋找其功能紊亂的調(diào)控機(jī)制一直是狼瘡研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。開展這方面的研究對于開發(fā)更精、有效的治療策略，同時(shí)減少治療副作用和提高長期預(yù)后具有重要意義。

本研究通過對初發(fā)狼瘡患者進(jìn)行單細(xì)胞測序，全面分析了ABC細(xì)胞獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄組特征和差異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。結(jié)合Cas9基因編輯技術(shù)和體外誘導(dǎo)分化體系，成功篩選出調(diào)控人和小鼠ABC細(xì)胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子ZEB2。團(tuán)隊(duì)在研究中對罕見病Mowat–Wilson綜合癥（ZEB2單倍劑量不足）患兒的外周血免疫細(xì)胞進(jìn)行了高維流式分析，發(fā)現(xiàn)由遺傳突變引起的ZEB2缺陷明顯降低了外周血中ABC細(xì)胞的比例。在狼瘡小鼠模型中觀察發(fā)現(xiàn)，B細(xì)胞中ZEB2缺陷可以減少ABC細(xì)胞的累積并緩解自身免疫的表型。

同時(shí)，該研究詳細(xì)揭示了ZEB2在ABC細(xì)胞中的調(diào)控機(jī)制，發(fā)現(xiàn)ZEB2能夠與Mef2b基因第一個(gè)內(nèi)含子區(qū)域的人鼠保守的增強(qiáng)子元件結(jié)合，抑制Mef2b基因的表達(dá)和其介導(dǎo)的生發(fā)中心反應(yīng)，從而促進(jìn)ABC途徑的濾泡外效應(yīng)B細(xì)胞反應(yīng)。此外，ZEB2還能夠促進(jìn)ABC特征基因的表達(dá)，并調(diào)控ABC細(xì)胞獨(dú)特的吞噬功能。通過對表型和機(jī)制的綜合分析，闡明了ZEB2在決定ABC細(xì)胞的譜系特化過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

該研究還發(fā)現(xiàn)ZEB2可以通過影響JAK-STAT信號(hào)調(diào)控ABC細(xì)胞的分化和功能。托法替尼和巴瑞替尼是目前已被批準(zhǔn)用于治療類風(fēng)關(guān)的JAK抑制劑藥物。在體外實(shí)驗(yàn)中，加入這兩種藥物均可以有效地減少ABC細(xì)胞的分化。研究人員在狼瘡小鼠中觀察到托法替尼的干預(yù)效果，能有效減少ABC細(xì)胞的累積和自身抗體水平。通過對托法替尼治療自身免疫疾病的隊(duì)列研究，他們發(fā)現(xiàn)靶向JAK-STAT通路可以有效降低外周ABC的比例，從而緩解疾病的活動(dòng)度。這些發(fā)現(xiàn)表明ZEB2-JAK-STAT調(diào)控軸在ABC誘導(dǎo)分化過程中發(fā)揮著重要作用，而干預(yù)ZEB2下游的JAK-STAT通路則有望緩解自身免疫疾病的發(fā)生和發(fā)展。