干細(xì)胞鞘內(nèi)給藥治療脊髓損傷的安全性和有效性

目前，使用自體間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞（MSCs）的細(xì)胞療法被配置為改善脊髓損傷（SCI）患者生活質(zhì)量的希望。然而，這些新技術(shù)仍處于起步階段，需要了解許多細(xì)節(jié)，例如選擇能夠獲得更好益處的患者的標(biāo)準(zhǔn)，或了解劑量或給藥指南。

根據(jù)以往在動(dòng)物模型和人體中的經(jīng)驗(yàn)，在脊髓未進(jìn)行解剖切片的情況下，MSCs的鞘內(nèi)或病灶內(nèi)給藥是一種安全且有用的策略，可在SCI中獲益。這意味著對每個(gè)SCI的磁共振成像 (MRI) 進(jìn)行仔細(xì)研究。

在同樣的知識領(lǐng)域，我們以前的經(jīng)驗(yàn)表明，自體MSCs優(yōu)于使用同種異體MSCs，并且使用自體血漿作為MSCs的支持優(yōu)于生理鹽水。另一方面，先前對患者的研究表明，這種細(xì)胞療法的益處與SCI慢性化時(shí)間的長短無關(guān)。此外，至少在某些功效參數(shù)中，益處與運(yùn)用的細(xì)胞數(shù)量之間似乎存在關(guān)系。

為了獲得更多關(guān)于SCI患者M(jìn)SC給藥不同指南可能性的經(jīng)驗(yàn)，我們在此展示了一項(xiàng)2期臨床試驗(yàn)的結(jié)果，該試驗(yàn)分析了鞘內(nèi)給藥自體MSCs的療效和安全性，指南為3劑1億劑間充質(zhì)干細(xì)胞，每次給藥間隔3個(gè)月（ClinicalTrials.gov NCT02570932）。

方法

我們在慢性SCI患者中進(jìn)行了一項(xiàng)2期臨床試驗(yàn)，這些患者接受了 3次100x106MSCs的鞘內(nèi)給藥，并在第一次給藥后隨訪了10個(gè)月。對9名患者進(jìn)行療效分析，對11名患者進(jìn)行安全性分析。在治療前和隨訪結(jié)束時(shí)進(jìn)行臨床量表、尿動(dòng)力學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)和神經(jīng)影像學(xué)研究。

治療包括蛛網(wǎng)膜下腔給藥，通過腰椎穿刺，從骨髓中獲得100x10^6個(gè)自體MSC，在自體血漿中擴(kuò)增和支持（研究的第1個(gè)月），在第4個(gè)月和第7個(gè)月重復(fù)，達(dá)到總給藥每個(gè)患者300x10^6個(gè)MSC。對患者進(jìn)行隨訪至第10個(gè)月。

評估指標(biāo)：通過以下量表從每位患者身上獲得臨床評分：ASIA提供的量表，國際神經(jīng)修復(fù)學(xué)協(xié)會(huì)的SCI功能評定量表（IANR-SCIFRS量表），用于評估神經(jīng)性疼痛的視覺模擬量表 (VAS) ，賓夕法尼亞大學(xué)和修改后的Ashworth分別用于評估痙攣和痙攣的量表，Geffner量表用于研究膀胱功能和神經(jīng)源性腸功能障礙 (NBD) 量表。還在治療前后進(jìn)行了神經(jīng)生理學(xué)、尿動(dòng)力學(xué)和MRI研究。

結(jié)果

不良事件：根據(jù) MedDRA術(shù)語對AE進(jìn)行分組。在研究期間，在屬于安全人群 (PS) 的11名患者中，其中4名患有某種類型的AE，一般為輕度強(qiáng)度，并被收集為暫時(shí)性坐骨神經(jīng)痛 (37.5%)、頭痛和以下區(qū)域的疼痛腰椎穿刺。存在與治療無關(guān)的嚴(yán)重AE，導(dǎo)致患者退出研究。

靈敏度和運(yùn)動(dòng)改善：在研究的第4個(gè)月，在第一次施用細(xì)胞后進(jìn)行的第一次評估中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)根據(jù)ASIA量表的敏感性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的改善（P=0.012，Pin Prick敏感性的效應(yīng)大?。‥S）=0.419，P=0.018，ES=0.395（輕觸靈敏度）。

在研究期間保持改善，隨訪結(jié)束時(shí)P值分別為0.018 (ES=0.396) 和0.011 (ES=0.426)

使用INR-SCIFRS量表評估的脊髓功能：IANR-SCIFRS量表通過九個(gè)部分評估全球脊髓功能，一個(gè)部分僅適用于男性并評估性功能。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)研究時(shí)，治療前全球IANR-SCIFRS平均得分為27.36分（SD，9.38分），研究結(jié)束時(shí)為36.20分（SD，5.71分），顯示出明顯且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義改善（P=0.009，ES=0.436；

痙攣和痙攣：在細(xì)胞療法治療之前，六名患者表現(xiàn)出不同程度的痙攣和/或痙攣，使用 Ashworth和Penn量表測量。兩種表現(xiàn)在治療過程中均有改善，但在隨訪結(jié)束時(shí)未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。

神經(jīng)性疼痛：在細(xì)胞治療之前，使用VAS量表測量的神經(jīng)性疼痛出現(xiàn)在8名患者中。在所有這些患者中，它在隨訪期間均減少或完全消失（P=0.012，ES=0.419），除了一名未改善神經(jīng)性疼痛的患者。表V顯示了使用VAS量表測量的神經(jīng)性疼痛評分的統(tǒng)計(jì)分析和演變。

細(xì)胞療法對神經(jīng)源性膀胱和腸道功能障礙的影響：我們使用Geffner和NBD的量表分析了膀胱和腸道功能障礙的可能改善情況。在測量膀胱功能的Geffner量表中，我們的患者觀察到改善

在評價(jià)神經(jīng)源性腸功能障礙的NBD量表中，從第一次運(yùn)用MSCs時(shí)觀察到明顯改善

在研究結(jié)束時(shí)，只有一名患者患有嚴(yán)重的NBD，一名患者患有中度NBD，一名患者患有輕微NBD，六名患者患有非常輕微的NBD。

臨床改善總結(jié)

圖5總結(jié)了在研究患者中獲得的改善?；颊?4和05不包括在 Per Protocol集中。

尿動(dòng)力學(xué)研究：根據(jù)尿動(dòng)力學(xué)研究，與細(xì)胞治療前進(jìn)行的研究相比，所有患者在研究結(jié)束時(shí)都表現(xiàn)出改善。表VIII顯示了每位患者在尿動(dòng)力學(xué)參數(shù)方面獲得的改善。在隨訪結(jié)束時(shí)，有6名患者（66.6%）記錄了自愿排尿的可能性，這在細(xì)胞治療之前沒有任何患者出現(xiàn)。

此時(shí)，5名患者（55.5%）在充盈時(shí)的第一感覺有所改善，3名患者（33.3%）在大膀胱測壓能力方面有所改善，5名患者（55.5%）在充盈時(shí)逼尿肌壓力降低，6名患者（66.6%）有所改善在作用后殘留物中。此外，6名患者 (66.6%) 的膀胱順應(yīng)性有所改善。

細(xì)胞治療后的尿動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)總結(jié)（10個(gè)月的隨訪）。根據(jù)這些研究，所有患者的一些研究參數(shù)均有所改善，66.6%的患者膀胱順應(yīng)性更好，用藥后殘留物減少。

神經(jīng)生理學(xué)發(fā)現(xiàn)：在隨訪結(jié)束時(shí)，7名患者在細(xì)胞治療前獲得的體感誘發(fā)電位 (SSEP) 或運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位 (MEP) 有所改善。四名患者表現(xiàn)出周圍神經(jīng)傳導(dǎo)的改善，四名患者表現(xiàn)出隨意肌收縮的改善。此外，在這四名患者中記錄了被認(rèn)為是典型的活躍肌肉再神經(jīng)支配的病灶下多相運(yùn)動(dòng)電位（表IX）。

細(xì)胞治療后神經(jīng)生理學(xué)數(shù)據(jù)總結(jié)（10個(gè)月隨訪）。在基線研究中，所有患者均出現(xiàn)雙側(cè)SSEP，振幅和潛伏期可變參數(shù)在研究結(jié)束時(shí)有5名患者 (55.5%) 有所改善。在細(xì)胞治療之前，所有患者的 MEP在5例（55.5%）中在研究結(jié)束時(shí)得到改善。兩名患者未在左側(cè)獲得基線MEP，但在這些患者中，在隨訪結(jié)束時(shí)確定了雙側(cè) MEP。3名患者 (33.3%) 的SSEP和MEP均有改善。

神經(jīng)影像學(xué)研究：在研究中的所有患者中，在細(xì)胞治療之前進(jìn)行了神經(jīng)影像學(xué)研究（圖6）。在隨訪結(jié)束時(shí)，磁共振研究未能顯示SCI形態(tài)的變化。

討論：我們目前的結(jié)果證實(shí)了鞘內(nèi)給藥自體間充質(zhì)干細(xì)胞對脊髓損傷患者的益處。該系列中只有一名患者（患者09）未能獲得臨床改善，盡管沒有臨床改善，但發(fā)現(xiàn)了自體間充質(zhì)干細(xì)胞移植對患者的尿動(dòng)力學(xué)變量的改善和神經(jīng)傳導(dǎo)敏感性的輕微改善。

無論如何，我們目前的結(jié)果支持先前的研究，表明鞘內(nèi)細(xì)胞治療與自體MSC對慢性和已確診脊髓損傷患者的安全性和臨床益處。在尿動(dòng)力學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)研究中獲得的結(jié)果為我們患者的臨床改善增加了客觀評估。

結(jié)論：該研究支持先前的證據(jù)，表明脊髓損傷患者在使用自體間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行鞘內(nèi)細(xì)胞治療后可以改善其神經(jīng)功能障礙。在沒有關(guān)于治療指南的數(shù)據(jù)的情況下，我們目前的經(jīng)驗(yàn)是，每3個(gè)月鞘內(nèi)運(yùn)用1億個(gè)細(xì)胞劑量的間充質(zhì)干細(xì)胞，多總共3億個(gè)，是安全的并且顯示出益處在脊髓損傷患者中。