T細胞α型趨化因子/CXC趨化因子受體-3生物軸在結(jié)腸癌組織中的作用及其意義

         本研究旨在探討干擾素誘導(dǎo)的T細胞α型趨化因子(I-TAC)及其受體CXC趨化因子受體-3(CXCR3)在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用.
         一、材料與方法
         1.材料:收集結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移手術(shù)標本22例(A組),以結(jié)腸癌無肝轉(zhuǎn)移手術(shù)標本20例(B組)為對照組.
         2.逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測I-TAC及CXCR3mRNA的表達:分別收集A和B組腫瘤組織,用Trizol法提取總RNA,進行cDNA合成和PCR擴增.引物根據(jù)Medline基因文庫用Primer 5.0軟件自行設(shè)計,產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳、Bio-PAD凝膠成像系統(tǒng)分析電泳條帶灰度值.目的條帶mRNA表達相對強度=目的條帶mRNA灰度值/β-actin條帶灰度值.
         3.Westernblot檢測I-TAC及CXCR3蛋白的表達:收集A組和B組腫瘤組織各3份,勻漿后,磷酸鹽緩沖液(PBS)調(diào)至等濃度,100℃水浴5min使蛋白變性,10%十二烷基硫酸鈉聚丙烯酞胺凝膠電;水,分別加人I-1-}(及CXI:R?多屯x于幾體4王孵育過夜1:,000稀釋的禹稱一才一:稀釋液中孵育,洗膜后以二氨基聯(lián)關(guān)膠(D:1B)顯色試劑盒顯色.
         4.免疫組織化學(xué)染色及結(jié)果判定:采用鏈霉菌抗生物素蛋日一過}l化物酶(SP)法,隨機選取10個計算躊個高倍視野(X400)下分別{敵100個鐘瘤細胞,計算陽吐細胞數(shù)占=E7}E.蓋‘數(shù)曰百分比,取均值,按腫瘤細抱ie性細范率和著色強度分別進行記分,其中1一3分表示弱陽性(+),4一7分表示陽性(++),8一12分為強陽性.
         5.統(tǒng)計學(xué)方法:應(yīng)用,Ps>16.0統(tǒng)計軟件分析,采用X}檢驗.
         二、結(jié)果 
         1.I-TAC,CXCR3mRN.}的表達:I-'I'ACmRNA在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移組中表達為0.54士0.10,在無肝轉(zhuǎn)移組表達為0.21士0.02,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.O5)}CXCR3mR=V在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移組中表達為0.8310.09,而在無肝轉(zhuǎn)移組表達為0.49士0.06,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05).
         2.I-TAC,CXCR3蛋白的表達:B組I-TAC,CXCR3蛋白的表達水平均明顯比A組低.
         3.免疫組織化學(xué):肝轉(zhuǎn)移組CXCR3表達陽性的16例,陽性率72.7%,無肝轉(zhuǎn)移組CXCR3表達陽性有7例,陽性率35.00%.兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.OS);I-TAC在肝轉(zhuǎn)移組有19例陽性表達,陽性率86.36%,I-TAC在無肝轉(zhuǎn)移組有9例陽性表達,陽性率45.00%,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)-1.CXCR3表達與結(jié)腸癌臨床病理特幾的關(guān)系:栩關(guān)性分析表明,CXCR3表達與結(jié)腸癌患者的組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、I-TAC呈正相關(guān)(P<0.05);與患者的性別年齡、腫瘤大小無明顯相關(guān)(p>0.O5).
         三、討論 新研究報道I-T.4C及受體CXCR在腫瘤中的作用,馬向濤等fl研究結(jié)果顯示結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與趨化因子受體CXCR4/CXCL12信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路關(guān)系密切許超等2通過體外遷移實驗發(fā)現(xiàn)CXCL10對高表達CXCR3的結(jié)腸癌細胞S}}`620和HT29的趨化作用非常顯著,而低表達CXCR3的結(jié)腸癌細胞SAX-"480趨化作用不明顯,提示體內(nèi)CXCL10對高表達CXCR3的腫瘤細胞具有一定趨化作用_本研究結(jié)果顯示,CXCR3與I-TAC在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移組中同時高表達,提示1-TAC/CXCR3生物軸在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中起一定的作用.
         參考文獻 
         馬向濤,余力偉,王彬. 結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與趨化因子受體CXCR4/CX-CL12信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)系[J].中華實驗外科雜志,2007,(1):60-61.doi:10.3760/j.issn:1001-9030.2007.01.024.
         許超,王強,蔡清萍. CXCR3在結(jié)直腸癌組織中的表達及臨床意義[J].中華實驗外科雜志,2008,(5):609-611.doi:10.3321/j.issn:1001-9030.2008.05.023.