電針內(nèi)關(guān)穴對海洛因依賴大鼠心率變異性的影響

【摘要】 目的：觀察海洛因依賴大鼠心率變異性的改變以及電針雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴對心臟生理的調(diào)整效應(yīng)，為針刺戒毒提供一定的理論依據(jù)。方法：將32只SD大鼠隨機(jī)分成對照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組按劑量逐日遞增原則，每日2次，連續(xù)9天皮下注射海洛因，第10天用納洛酮催促戒斷，確定海洛因依賴模型的建立；再將實(shí)驗(yàn)組分為非電針組、電針內(nèi)關(guān)穴組和電針非穴位組,每組8只動物；非電針組繼續(xù)給予海洛因維持劑量，電針內(nèi)關(guān)穴組停止給藥，處于自然戒斷狀態(tài),同時選取內(nèi)關(guān)穴進(jìn)行電針治療，每天1次，連續(xù)7天；電針非穴位組選取雙側(cè)肋下4個固定非穴點(diǎn)，治療同內(nèi)關(guān)穴組；對照組按同樣方法注射等量生理鹽水；4組各自進(jìn)行30分鐘心率變異性取樣,對大鼠的心率變異性進(jìn)行對照分析。結(jié)果：與對照組相比,海洛因依賴大鼠非電針組正常RR間期的標(biāo)準(zhǔn)差(SDNN)、相鄰RR間期之差的標(biāo)準(zhǔn)差(SDSD)、相鄰RR間期之差的均方根(rMSSD)均降低(P<0.01)，LF、HF也降低(P<0.01)；LF/HF比值升高,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與非電針組比較,電針內(nèi)關(guān)穴組SDNN、SDSD、rMSSD均升高(P<0.05)，LF、HF也升高(P<0.05)，LF/HF比值減小，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；電針非穴位組各項(xiàng)指標(biāo)與非電針組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；SDNN與LF呈顯著正相關(guān)（r=0.864,P<0.01），rMSSD與HF呈顯著正相關(guān)（r=0.92,P<0.01）。結(jié)論：海洛因依賴大鼠心率變異性降低,自主神經(jīng)調(diào)控功能降低；電針內(nèi)關(guān)穴可以使海洛因依賴大鼠降低的心率變異性提高,心迷走活動加強(qiáng)，交感－迷走神經(jīng)的均衡發(fā)生改變，自主神經(jīng)功能得到良性調(diào)整。

【關(guān)鍵詞】 海洛因依賴；心率變異性；電針；內(nèi)關(guān)穴

Effects of Neiguan Points Electroacupunture on Heart Rate Variability in Heroin-dependence Rats

PAN Li, PAN Guishu

(Department of Cardiology, Baotou Hospital of Tradtional Mongolian and Chinese Medicine, Baotou 014040,China)

Abstract ob[x]jective: To investigate changes in heart rate variability of heroin-dependence rats and to test the adjusting function of autonomic nervous system by acupuncturing Neiguan points electrically. Methods: Thirty-two SD rats were randomly divided into the control group and the experimental group, Heroin was injected subcutaneously twice a day, for 9 days on the principle of daily increasing dose in the rats of the experimental groups . On the tenth day, the withdrawal signs precipitated by intraperitoned injection of naloxone was evaluated and the heroin-dependent model was established .Then the rats from the experimental group were sub-divided into non-electroacupunctured group, Neiguan points electroacupuntured group and non-points electroacupuntured group, with 8 rats for each group. Experiments were respectively conducted in heart rate variability of rats in four groups for 30 minutes and the data were analyzed respectively. Results: Compared with the control group, SDNN, rMSSD and SDSD in non-electroacupunctured group obviously dropped, LF and HF also significantly fell , and the ratio of LF and HF rose, but with no significant difference ;Compared with non-electroacupunctured group, SDNN, rMSSD and SDSD in Neiguan points electroacupuntured group increased , LF and HF also increased and the ratio of LF and HF dropped, but there was no significant difference ; There was no significant difference either in electroacupunctured non-points group. SDNN positively correlated with LF , and there was a positive correlation between rMSSD and HF. Conclusion: HRV in heroin-dependence rats decreases ,which indicates the functional disturbance of autonomic nervous system. It is suggested that HRV in rats are raised and parasympathetic fiber activities are improved by electroacupuncture of Neiguan Points. The balance between the sympathetic and parasympathetic fiber is regulated and the functions of autonomic nervous system are improved .

Key words Heroin-dependence ; Heart rate variability; Electroacupuncture ; Neiguan points

海洛因是嗎啡的衍生物,其乙?；Y(jié)構(gòu)通過血腦屏障進(jìn)入中樞,作用于大腦不同腦區(qū)的阿片受體,產(chǎn)生不同的藥理作用[1-2],其主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),而對心血管系統(tǒng)也可產(chǎn)生間接影響。對心血管的作用主要是海洛因制劑中的混入物-奎寧,它對心肌有直接毒性作用,其代謝產(chǎn)物通過抑制血管運(yùn)動中樞而間接對心臟產(chǎn)生影響。據(jù)文獻(xiàn)報道,海洛因依賴者中55%有心電圖異常,常見有傳導(dǎo)阻滯、去極化及復(fù)極異常等[3]。

心率變異性(heart rate variability,HRV)是近年來研究的熱點(diǎn)問題，但是用于海洛因成癮的研究很少。HRV是新近發(fā)展起來的反映心臟自主神經(jīng)功能活動的一項(xiàng)能定量、可重復(fù)的檢測方法，是指逐次檢測竇性心搏間心動周期的微小差異，反映竇性心律的波動變化過程，其發(fā)生的主要機(jī)制是心臟的電活動節(jié)律直接接受心臟交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)雙重調(diào)節(jié)并相互平衡。正常情況下，迷走神經(jīng)對HRV起著決定作用，迷走神經(jīng)功能健全時HRV大，迷走神經(jīng)功能受損時HRV小。HRV反映自主神經(jīng)系統(tǒng)活性和定量評估心臟交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)張力及其平衡性[4]。研究表明,心率異常的變化是與一定的病理?xiàng)l件相聯(lián)系的,對HRV信號的分析,能了解在一定病理?xiàng)l件下,自主神經(jīng)系統(tǒng)交感-副交感神經(jīng)活動均衡性所受到的影響[5-7]。本文對海洛因成癮大鼠的HRV信號進(jìn)行了分析,希望從分析的信號中提取出吸毒對人體影響的特征信息,獲取一些對吸毒者生理狀況及其治療后康復(fù)狀況的評估有參考價值的結(jié)論。

1 材料與方法

1.1 材料 健康SD大鼠32只,雌雄不拘,體重180～220g,重慶第三軍醫(yī)大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供,生產(chǎn)許可證號SCXK(渝)20020003。分籠飼養(yǎng),自由飲水、進(jìn)食。

1.2 試劑與儀器 海洛因(純度61.48%,貴州省公安廳提供),鹽酸納洛酮注射液(湖南益橋制藥有限公司)，TLC4000 US全息動態(tài)心電分析系統(tǒng)（河北秦皇島康泰醫(yī)療器械有限公司），LH-402型韓氏穴位神經(jīng)刺激儀（北京力普康醫(yī)藥科技發(fā)展公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 將32只SD大鼠隨機(jī)分成對照組（8只）和實(shí)驗(yàn)組（24只）。實(shí)驗(yàn)組參照文獻(xiàn)的方法建立海洛因依賴大鼠模型[8]，海洛因依賴組大鼠按逐日遞增海洛因3mg/kg的原則，首日每次劑量3mg/kg,2次/天（上午9點(diǎn)，下午4點(diǎn)），連續(xù)皮下注射9天，第9天每次劑量達(dá)27mg/kg；第10天給海洛因依賴組大鼠腹腔注射5mg/kg納洛酮，誘發(fā)戒斷癥狀并與已建立的海洛因依賴大鼠模型戒斷標(biāo)準(zhǔn)比較，確定模型是否建立成功。再將實(shí)驗(yàn)組分為非電針組、電針內(nèi)關(guān)穴組和電針非穴位組,每組8只動物。非電針組繼續(xù)給予海洛因維持量27mg/kg，1次/天,連續(xù)7天；電針內(nèi)關(guān)穴組停止給藥，處于自然戒斷狀態(tài),同時選取內(nèi)關(guān)穴進(jìn)行電針治療，每天1次，連續(xù)7天；電針非穴位組選取雙側(cè)肋下4個固定非穴點(diǎn)，治療同內(nèi)關(guān)穴組；對照組按同樣方法注射等量生理鹽水。

1.4 針刺治療 根據(jù)中國針灸學(xué)會實(shí)驗(yàn)針灸研究會制定的“動物針灸穴位圖譜”［9］選取內(nèi)關(guān)穴進(jìn)行電針(HANS)治療。電針方法:內(nèi)關(guān)穴(前肢內(nèi)側(cè),距腕關(guān)節(jié)約3mm的尺橈骨間,直刺1mm),用1.5寸毫針刺入深度為0.5～0.8寸,行提插捻轉(zhuǎn)平補(bǔ)平瀉之手法,分別接韓氏穴位神經(jīng)刺激儀，進(jìn)針后，順著經(jīng)脈走向進(jìn)針，不進(jìn)行手法刺激，施以連續(xù)波，波寬0.3ms，頻率2/100Hz，疏密波交替，電壓2～4V，強(qiáng)度以大鼠能安靜耐受為度。刺激強(qiáng)度采用1mA、2mA、3mA逐漸遞增法,每10分鐘更替1次,刺激持續(xù)時間為30分鐘。每天1次，連續(xù)治療1周。

1.5 HRV實(shí)驗(yàn)方法 電針組出針后1分鐘,對照組與非電針組各自進(jìn)行HRV取樣,對所取的30分鐘資料中SDNN、rMSSD、SDSD等時域指標(biāo)和HF、LF、LF/HF等頻域指標(biāo)進(jìn)行分析。采樣過程中避免干擾,將大鼠用25%氨基甲酸乙酯(4mL/kg)麻醉,固定四肢,采集V1心電信號,避免各種影響自主神經(jīng)活動的因素。

1.6 統(tǒng)計分析 將所有數(shù)據(jù)以均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較若滿足正態(tài)分布且方差齊時采用單因素方差分析LSD法,方差不齊時選用Tamhame’S T2法進(jìn)行方差檢驗(yàn)；若為偏態(tài)分布，先經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換再進(jìn)行分析。兩變量間的關(guān)系采用直線相關(guān)分析，所有數(shù)據(jù)均輸入計算機(jī)，用SPSS 13.0軟件進(jìn)行處理，顯著性界值為P<0.01或P<0.05。

2 結(jié)果

進(jìn)行HRV分析時，采用計算機(jī)自動分析加人工校正,剔除干擾及偽差、早搏（海洛因成癮大鼠可觀察到頻發(fā)房性早搏及偶發(fā)室性早搏）及其他非竇性異位搏動不在心率變異計算范圍內(nèi)。

2.1 HRV結(jié)果分析 海洛因成癮非電針組與對照組比較，時域分析各項(xiàng)指標(biāo)SDNN、SDSD、rMSSD均顯著降低(P<0.01)；頻域分析各項(xiàng)指標(biāo)LF、HF也顯著降低(P<0.01)，LF/HF升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與非電針組比較,電針內(nèi)關(guān)穴組SDNN、SDSD、rMSSD均升高(P<0.05)，LF、HF也升高(P<0.05)，LF/HF比值減小，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；電針非穴位組與非電針組比較,SDNN、SDSD、rMSSD和LF、HF差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,見表1、表2。表1 各組HRV時域分析各項(xiàng)指標(biāo)的比較表2 各組HRV頻域分析各項(xiàng)指標(biāo)比較

　　2.2 相關(guān)性分析 本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)運(yùn)用直線回歸法分析表明，大鼠HRV時域分析指標(biāo)與頻域分析指標(biāo)呈正相關(guān)，即SDNN與LF呈顯著正相關(guān)（r=0.572,P<0.01）,rMSSD與HF呈顯著正相關(guān)（r=0.634,P<0.01）。

3 討論

海洛因是半合成產(chǎn)品,具有比嗎啡更強(qiáng)的成癮性,通常認(rèn)為海洛因的藥理作用是來源于嗎啡,通過作用于心臟阿片受體,改變細(xì)胞內(nèi)Ca2 +濃度,使心室肌細(xì)胞動作電位改變[10]，間接或直接影響心臟的除極、復(fù)極等心肌電生理,從而影響心肌的自律性。

HRV是心血管調(diào)節(jié)系統(tǒng)對各種生理變化的動力學(xué)反應(yīng),心率的波動是交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)、腎素-血管緊張素系統(tǒng)功能共同作用的結(jié)果。HRV反映交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)在心率調(diào)節(jié)方面的相互作用和平衡關(guān)系,交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)的相互協(xié)調(diào)作用維持著正常的心跳節(jié)律,一旦這種相互協(xié)調(diào)作用失衡,將導(dǎo)致心率和心律的改變,這是HRV分析的生理基礎(chǔ)。因此,HRV信號分析能有效評價機(jī)體的植物神經(jīng)功能狀況。迷走神經(jīng)活動減弱，HRV降低；而迷走神經(jīng)活動增高，對心臟有保護(hù)作用。在HRV時域分析法指標(biāo)中，SDNN是常用的指標(biāo)，反映總體HRV的變化,而頻域法分析可將交感神經(jīng)與副交感神經(jīng)活動的成分分開，HF是代表心臟副交感神經(jīng)活動的可靠指標(biāo)，LF由交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)雙重介導(dǎo)，LF/HF是反映交感神經(jīng)與副交感神經(jīng)張力平衡變化的敏感指標(biāo)。時域法與頻域法聯(lián)合應(yīng)用可更全面地反映HRV的變化，它體現(xiàn)了神經(jīng)體液調(diào)節(jié)變化程度，蘊(yùn)涵了心血管系統(tǒng)調(diào)節(jié)的大量生理信息。通過對這些信號進(jìn)行提取和分析，可定量評估心交感及副交感神經(jīng)活動的強(qiáng)弱和相互作用。

大量研究發(fā)現(xiàn)，時域分析法和頻域分析法所測的參數(shù)指標(biāo)有一定的相關(guān)性。HRV指標(biāo)中HF和rMSSD反映了迷走神經(jīng)功能活性;LF主要反映了交感神經(jīng)活動性，同時也受迷走神經(jīng)活性的影響，故反映了交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)的共同作用;LF/HF反映了交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)的平衡情況。因此HF與rMSSD具有相關(guān)性，LF與SDNN具有相關(guān)性，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致。

本文結(jié)果顯示,海洛因依賴大鼠HRV時域分析指標(biāo)SDNN、SDSD、rMSSD和頻域分析指標(biāo)LF、HF均降低，提示自主神經(jīng)系統(tǒng)對心臟的調(diào)節(jié)作用減弱；LF/HF比值升高，提示迷走神經(jīng)-交感神經(jīng)平衡失調(diào)，心臟自主神經(jīng)喪失了迷走神經(jīng)對心臟的保護(hù)作用。而HRV是反映神經(jīng)、體液因素對心血管精細(xì)調(diào)節(jié)的敏感指標(biāo)，推測其機(jī)制可能是海洛因依賴導(dǎo)致中樞心血管調(diào)節(jié)區(qū)域－下丘腦、腦干、海馬結(jié)構(gòu)中兒茶酚胺(Catecholamine,CA)遞質(zhì)釋放增多，乙酰膽堿（Acetylcholine，ACh）釋放減少，神經(jīng)介質(zhì)內(nèi)皮素（Endothelin，ET）、一氧化氮（Nitric Oxide，NO）水平升高，ET mRNA與一氧化氮合酶（Nitric Oxide synthase，nNOS）mRNA表達(dá)增強(qiáng)，促使心肌失去同步性能，HRV降低。

研究表明，針刺內(nèi)關(guān)穴對心臟具有明顯的保護(hù)作用。針刺內(nèi)關(guān)通過對心功能、心電、心肌代謝和神經(jīng)體液等多方面產(chǎn)生影響，從而發(fā)揮對心臟的保護(hù)作用。林華等[11]將心肌缺血患者隨機(jī)分為針刺內(nèi)關(guān)及足三里治療組，發(fā)現(xiàn)針刺內(nèi)關(guān)使冠心病左室收縮及舒張功能得到明顯改善，部分指標(biāo)與足三里穴比較有統(tǒng)計學(xué)意義，證實(shí)了內(nèi)關(guān)穴與心臟相關(guān)的相對特異性。另有研究證明，針刺內(nèi)關(guān)穴有促進(jìn)心率恢復(fù)正常的良性調(diào)整作用，此種效應(yīng)優(yōu)于足三里穴，也證實(shí)了內(nèi)關(guān)穴作用于心臟的相對特異性[12]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，針刺內(nèi)關(guān)穴可以使海洛因依賴大鼠降低的HRV指標(biāo)升高（P<0.05)，迷走神經(jīng)活性相應(yīng)提高，LF/HF比值降低，提示交感神經(jīng)－迷走神經(jīng)平衡失調(diào)得到改善，推測針刺內(nèi)關(guān)的效應(yīng)可能是使中樞心血管調(diào)節(jié)區(qū)域ET、NO、CA釋放減少，阻斷ET mRNA與nNOS mRNA的異常表達(dá)，增加ACh含量，并降低血中去甲腎上腺素（Noradrenaline，NA）、多巴胺（Dopamine,DA）、ET及NO水平，使心肌逐漸恢復(fù)同步功能，從而使HRV增加。本文結(jié)果顯示,針刺內(nèi)關(guān)穴對海洛因依賴大鼠HRV的降低具有明顯的改善作用，針刺后心率變異程度增大,植物神經(jīng)對心率的良性調(diào)控作用加強(qiáng),說明針刺可良性調(diào)整自主神經(jīng)功能，提高迷走神經(jīng)張力，預(yù)防心肌損傷和心律失常的發(fā)生，為臨床電針脫癮治療海洛因依賴稽延性戒斷癥狀提供一定的理論依據(jù)。

針刺戒毒的神經(jīng)生理學(xué)機(jī)制表明，針刺可使交感神經(jīng)與副交感神經(jīng)的功能狀態(tài)恢復(fù)相對平衡，消除植物神經(jīng)的功能紊亂，使戒斷癥狀得到抑制，或與針刺麻醉相反，使患者出現(xiàn)戒斷綜合征癥狀所形成的彌散性疼痛信息變得可以耐受，甚至微不足道，從而起到戒斷毒癮的作用[13]。在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，心動過速是阿片成癮者脫毒期的主要體征之一，可被經(jīng)皮電刺激HANS所抑制[14]。已有研究表明，外周的電刺激可抑制阿片戒斷癥狀[15]。由此推論，通過電針刺激有可能使阿片依賴者的戒斷癥狀得到緩解，并有助于阿片脫癮，為針灸戒毒的臨床應(yīng)用提供了客觀依據(jù)。

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