短暫性腦缺血發(fā)作患者清腦通絡方治療前后血漿CD41/CD42b表達的臨床意義

【摘要】 目的觀察短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)患者治療前后血小板膜糖蛋白CD41、CD42b表達的變化。方法采用隨機對照試驗，觀察病例338例，分為清腦通絡方組163例，阿司匹林組175例。觀察清腦通絡方和阿司匹林腸溶片治療前后TIA患者血漿血小板膜糖蛋白CD41、CD42b表達的變化。應用流式細胞術，測定TIA患者的CD41、CD42b的分子表達。結果兩組均有顯著降低TIA患者血小板膜糖蛋白CD41表達作用，對CD42b的表達無明顯影響；治療后兩組血流變指標有明顯改善。結論清肝活血治療對TIA患者血小板膜糖蛋白CD41表達有顯著抑制作用，能明顯改善TIA患者的血流變指標。

【關鍵詞】 短暫性腦缺血發(fā)作； CD41； CD42b

　　Abstract:ob[x]jectiveTo study the correlativity of platelet membrance glycoprotein CD41 and CD42b ex[x]pression in patients with TIA before and after Qing Nao Tong Luo Fang therapy．MethodsThe ex[x]pressions of platelet CD41、CD42b were determined by flow cytometry and hemorheological indexes in 338 patients with TIA before and after therapy with Qing Nao Tong Luo Fang and aspirin.There were 163 patients in Qing Nao Tong Luo Fang group and 175 patients in aspirin group．ResultsCD41 levels in two groups were significantly lower after therapy than before(P<0.05), CD42b levels in two groups did not significantly change. There was no difference between the patients in Qing Nao Tong Luo Fang group and in aspirin group(P>0.05)．Ameliorate hemorheological indexes changed obviously.ConclusionQing Nao Tong Luo Fang therapy can inhibit platelet CD41 ex[x]pression in patients with TIA and improve the ameliorate hemorheological indexes.

　　Key words:Transient ischemic attack； CD41； CD42b

缺血性中風不但發(fā)病率高，而且病死率、致殘率、復發(fā)率均很高，絕大多數(shù)中風在發(fā)病前的一段時間（數(shù)月乃至數(shù)年）有先兆表現(xiàn)，稱為短暫性腦缺血發(fā)作，中醫(yī)稱為中風先兆證。在全國中醫(yī)腦病專家張學文教授指導下，我們通過多年臨床觀察，表現(xiàn)肝熱血瘀是中風先兆證的主要病理機制。本研究應用張學文教授經(jīng)驗方“清腦通絡方”治療TIA，觀察該方對TIA患者血小板膜糖蛋白CD41、CD42b表達的影響和對血流變指標的影響?，F(xiàn)總結如下。

　　1 臨床資料

　　1.1 病例選擇

　　診斷標準參照1995年中華醫(yī)學會第四次全國腦血管病學術會議TIA診斷要點［1］:①為短暫的、可逆的、局部的腦血液循環(huán)障礙，可反復發(fā)作，少者1～2次，多者數(shù)十次；②可以表現(xiàn)為頸內動脈系統(tǒng)和（或）椎-基底動脈系統(tǒng)癥狀和體征；③每次發(fā)作持續(xù)時間通常在數(shù)分鐘至1 h左右，癥狀和體征應在24 h以內完全消失。凡年齡40歲以上，80歲以下，符合TIA診斷標準，且知情同意者可納入本觀察。排除標準：已發(fā)生腦卒中者；合并有心、肝、腎、造血系統(tǒng)和內分泌系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾?。òㄐ姆坷w顫、心力衰竭、肝功衰竭、腎功衰竭、風濕性疾病等）；精神病患者；有阿司匹林禁忌者。

　　1.2 一般資料

　　選擇20030301～20041231在廣東省中醫(yī)院神經(jīng)內科門診就診的TIA病人。本組設計觀察病例400例，終完成病例338例，脫落62例。隨機分為兩組，治療組（清腦通絡方）163例，其中男101例，女62例；平均年齡（52.71±7.38）歲。對照組（阿司匹林）175例，其中男103例，女72例；平均年齡（51.91±6.84）歲。兩組年齡、性別、TIA發(fā)作類型、發(fā)作頻度及治療前病程無顯著差異，具有可比性。

　　1.3 試劑及儀器

　?、贌晒馑貥擞浀难“鍐慰寺】贵w：雙標試劑CD41-FITC/CD42b-PE，同型對照IgG1-FITC/-PE（均購自美國Caltag公司）；②儀器為美國Beckman Coulter公司流式細胞儀，型號為ELITE ESP型，激光光源為15 mW的氬離子激光。

　　2 治療方法

　　2.1 基礎治療兩組在試驗性治療期間均進行常規(guī)降壓、降脂、降糖治療，均不使用其他活血化瘀藥物、抗血小板藥物、抗凝藥物。

　　2.2 治療組在基礎治療上加服清腦通絡方顆粒劑（單味藥顆粒劑由江蘇江陰中藥廠生產(chǎn)）。組成：決明子0.5 g（相當于生藥10 g），丹參2 g（相當于生藥10 g），山楂3 g（相當于生藥10 g），赤芍1.5 g（相當于生藥10 g），川芎2 g（相當于生藥6 g），水蛭0.5 g（相當于生藥3 g），1劑/d，晨起用溫開水沖服，1次/d，連續(xù)服藥30 d。

　　2.3 對照組口服阿司匹林腸溶片（德國拜爾制藥公司），100 mg/次，每天早晨1次，連續(xù)服藥30 d。

　　2.4 觀察指標觀察治療前和治療后兩組患者血小板膜糖蛋白CD41、CD42b表達和血流變指標變化。

2.4.1 CD41、CD42b檢測治療前和治療后采病人外周血1 ml，EDTA抗凝，樣品管加10 μl雙標抗體 + 100 μl PBS + 5 μl全血；對照管加10 μl同型對照抗體 + 100 μl PBS + 5 μl全血，樣品管和對照管輕輕混勻，室溫避光孵育15 min；樣品管和對照管均加入2～3 ml含1%多聚甲醛的PBS終止反應，上機檢測。以CD41和CD42b 的前向及側向角光散射雙參數(shù)設血小板門，取血小板細胞群，計數(shù)CD41、CD42b陽性細胞百分比。

　　2.4.2 血液流變學檢測治療前和治療后清晨用硅油處理的肝素鋰抗凝管空腹采肘靜脈血4 ml，搖勻，送我院檢驗科檢測全血粘度，血漿粘度，血小板粘附率。

　　2.5 統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)以±s表示，以t檢驗進行統(tǒng)計學處理，用PEMS統(tǒng)計分析軟件完成處理過程。

　　3 結果

　　3.1 兩組治療前后血小板膜糖蛋白CD41和CD42b表達比較結果

　　見表1。表1 兩組治療前后血小板膜糖蛋白CD41和CD42b表達比較（略）

清腦通絡方組和阿司匹林組治療后血小板膜糖蛋白CD41表達百分率和平均熒光強度均明顯降低（P<0.05），CD42b表達百分率和平均熒光強度無明顯變化（P>0.05）。

　　3.2 兩組治療前后血液流變學指標變化比較

　　結果見表2。表2 兩組治療前后血液流變學指標變化比較（略）

兩組治療后血液流變學各項指標均有改善，與治療前比較，差異有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。治療后治療組降低全血高切粘度與對照組比較，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。

　　4 討論

急性腦血管病是威脅人類健康的三大疾病之一，具有發(fā)病率高、致殘率高的特點，給社會和家庭帶來沉重的負擔。我國每年新發(fā)腦血管疾病約200萬例，其中缺血性中風約占中風總數(shù)的55%～80%?？寡“逯委熓怯行ьA防中風的主要手段之一［2］。然而，許多患者雖然一直堅持服用抑制血小板聚集的阿司匹林，但仍不能完全預防中風,這種現(xiàn)象與阿司匹林抵抗有關［3］。缺血性中風危險因素和病因較多，缺血性中風的預防應針對不同的病因和危險因素進行綜合預防［4］。

我們臨床研究發(fā)現(xiàn)，“肝熱血瘀”是導致缺血性中風的根本原因，治療上應用清肝和血治法自擬清腦通絡方治療中風先兆證，該方主要由決明子、丹參、山楂、赤芍、川芎、水蛭等藥物組成，具有清肝和血、化瘀通絡功效［5］。我們以往的研究表明，清腦通絡方對降低TIA發(fā)作和預防中風發(fā)生有明顯作用，尤其在改善TIA患者臨床癥狀方面作用顯著，能顯著改善患者眩暈、頭痛、肢體麻木、失眠之臨床癥狀是該藥的顯著特點，明顯優(yōu)于阿司匹林，清腦通絡方具有明顯降低TIA患者TIA發(fā)作次數(shù)，預防和延緩TIA患者發(fā)生中風的進程［6］。

　　血小板膜糖蛋白GP IIb／IIIa(CD41／CD42b) 是血小板膜上含量多的糖蛋白，該復合物是一個完整的功能單位，與膠原、vWF因子、纖維連接蛋白和玻璃體連接蛋白結合，發(fā)生血小板的粘附和聚集，此為血小板聚集、粘附和血小板血栓形成的終關鍵步驟，是缺血性事件發(fā)生的重要環(huán)節(jié)，因此，CD41的表達可作為預測血栓性疾病的指標。研究顯示腦梗死患者血小板CD41表達較對照組增高，我們利用流式細胞術檢測TIA患者CD41的表達，也發(fā)現(xiàn)CD41平均熒光強度和表達百分數(shù)較對照組顯著升高，經(jīng)清腦通絡方治療后CD41平均熒光強度和表達百分數(shù)顯著降低。 CD42b是血小板的主要糖蛋白之一，靜息時均勻分布在整個血小板膜表面，是凝血酶的受體，當血小板被激活時，CD42b迅速從膜表面轉移到中央管中，導致膜表面含量減少。本研究顯示，TIA患者治療前后CD42b無明顯變化（P>0.05）。

　　本研究表明，清腦通絡方能明顯抑制血小板CD41的表達，降低血小板粘附性，降低全血粘度和血漿粘度，因此，在治療TIA和預防缺血性腦血管病方面有明顯療效。

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