揭示腫瘤成纖維細(xì)胞Fcγ受體調(diào)控單抗

單克隆抗體是腫瘤靶向治療的重要藥物。單克隆抗體由抗原結(jié)合域（Fab）和恒定區(qū)（Fc）組成。單抗的Fab與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，Fc會被Fcγ受體識別。傳統(tǒng)認(rèn)為Fcγ受體只表達(dá)于造血系統(tǒng)。尤其是白細(xì)胞的Fcγ 受體對單抗治療效果起到關(guān)鍵作用。細(xì)胞Fcγ 受體介導(dǎo)作用（cellular FcγR-mediated effects）主要有三種：1）抗體依賴的細(xì)胞毒作用（ADCC）：NK 細(xì)胞Fcγ 受體激活后，通過釋放穿孔素和顆粒酶殺傷單抗結(jié)合的腫瘤細(xì)胞；2）抗體依賴的細(xì)胞吞噬（ADCP）：巨噬細(xì)胞Fcγ 受體激活后，吞噬與單抗結(jié)合的腫瘤細(xì)胞；3）樹突狀細(xì)胞通過 Fcγ 受體攝取免疫復(fù)合物，進(jìn)而提呈腫瘤抗原并激活抗腫瘤特異免疫。

值得注意的是，近期研究發(fā)現(xiàn)一些非白細(xì)胞也會表達(dá)Fcγ受體。例如，小鼠感覺神經(jīng)元表達(dá)I型Fcγ受體，介導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)疼痛；肝臟內(nèi)皮竇狀細(xì)胞表面的II型Fcγ受體影響循環(huán)免疫復(fù)合物的清除。然而目前對腫瘤微環(huán)境中非白細(xì)胞表達(dá)Fcγ受體未見報道。該研究鑒定出一群表達(dá)III型Fcγ受體（CD16）的成纖維細(xì)胞亞群，報道促癌的Fcγ受體信號。揭示成纖維細(xì)胞Fcγ受體激活后收縮膠原，阻礙藥物遞送導(dǎo)致單抗治療耐藥。

研究者應(yīng)用全光譜流式分析技術(shù)，對新鮮人乳腺癌標(biāo)本中表達(dá)Fcγ受體細(xì)胞圖譜分布進(jìn)行檢測。與預(yù)期一致的是表達(dá)Fcγ受體的主要是CD45+的白細(xì)胞。令人意外的是，一部分表達(dá)CD32b/c (IIb/IIc型Fcγ受體) 和 CD16的細(xì)胞是CD45-的非白細(xì)胞。通過流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光等技術(shù)，研究者進(jìn)一步確證CD32b/c+的非白細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞，而表達(dá)CD16的CD45-細(xì)胞是一個新的成纖維細(xì)胞亞群（圖1）。CD16+成纖維細(xì)胞數(shù)目只在HER2+乳腺癌患者中與不良預(yù)后相關(guān)，并和抗HER2單抗（曲妥珠單抗）治療耐藥相關(guān)。在此基礎(chǔ)上，研究者從乳腺癌患者腫瘤標(biāo)本中分離CD16+成纖維細(xì)胞，建立了人源性腫瘤異種移植 (Patient-derived tumor xenograft, PDX) 模型、腫瘤細(xì)胞與成纖維細(xì)胞的共注射小鼠模型，發(fā)現(xiàn)CD16+成纖維細(xì)胞能夠?qū)е虑字閱慰怪委熌退帯ｈb于成纖維細(xì)胞在腫瘤結(jié)締組織增生 (desmoplasia) 中起到關(guān)鍵作用，研究者應(yīng)用原子力顯微技術(shù)對患者乳腺癌新鮮標(biāo)本的彈性模量進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)曲妥珠單抗耐藥患者的腫瘤硬度更大，而CD16+ 成纖維細(xì)胞的浸潤數(shù)目與組織硬度正相關(guān)。并且在曲妥珠單抗治療后，CD16+ 成纖維細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞間的平均距離明顯縮短。

在移植瘤模型中，研究者觀察到CD16+ 成纖維細(xì)胞能夠在曲多珠單抗治療后產(chǎn)生膠原纖維和透明質(zhì)酸等細(xì)胞外基質(zhì)，抑制腫瘤組織的血管灌注。應(yīng)用3D熒光顯微成像技術(shù)，發(fā)現(xiàn)CD16+ 成纖維細(xì)胞阻礙了腫瘤組織中曲妥珠單抗及其與化療聯(lián)合用藥時化療藥物的遞送 。研究者進(jìn)一步借助敲入人HER2基因、能夠耐受人HER2蛋白的ErbB2+轉(zhuǎn)基因小鼠模型還原體內(nèi)研究模型的真實微環(huán)境。發(fā)現(xiàn)在曲妥珠單抗的母藥鼠抗人HER2單抗——4D5的作用下，CD16+ 成纖維細(xì)胞還能夠抑制NK和CD8+T細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致治療耐藥。

既往研究表明Fcγ受體胞內(nèi)段能夠與SYK相互作用，從而激活VAV蛋白家族【7】。在線蛋白組數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)顯示，VAV1和VAV3主要分布在造血系統(tǒng)細(xì)胞中。有趣的是，VAV2 在造血系統(tǒng)細(xì)胞的表達(dá)量不高、反而在成纖維細(xì)胞中高表達(dá)。在腫瘤與成纖維細(xì)胞共注射小鼠模型中，VAV2敲除能夠抑制單抗治療下CD16+ 成纖維細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤結(jié)締組織增生、逆轉(zhuǎn)單抗治療耐藥。進(jìn)一步應(yīng)用成纖維細(xì)胞體外三維熒光培養(yǎng)模型，研究者發(fā)現(xiàn)敲除VAV2能夠阻止單抗與成纖維細(xì)胞CD16作用產(chǎn)生的下游信號，但卻不會對巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞的ADCP和ADCC抗腫瘤作用產(chǎn)生影響。因此，靶向VAV2能夠特異性阻止單抗治療下Fcγ受體的促癌信號，而不干擾免疫細(xì)胞Fcγ受體介導(dǎo)的抗腫瘤作用?？偟膩碚f，本研究報道非白細(xì)胞表達(dá)Fcγ受體在腫瘤微環(huán)境中的作用，揭示了第一種促癌的Fcγ 受體介導(dǎo)作用，并提出特異靶向促癌Fcγ信號又不影響抑癌Fcγ信號的治療靶點(diǎn)(圖2)。成纖維細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境中數(shù)量豐富的間質(zhì)細(xì)胞，是腫瘤進(jìn)展的重要參與者。但無差別耗竭成纖維細(xì)胞反而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。宋爾衛(wèi)院士和蘇士成團(tuán)隊前期研究發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中 CD10+GPR77+ CAF新亞群，該亞群通過改變腫瘤干細(xì)胞微環(huán)境維持腫瘤細(xì)胞干性，引起化療抵抗。該研究進(jìn)一步闡明了惡性腫瘤成纖維細(xì)胞的亞群多樣性及其功能，對于發(fā)展靶向成纖維細(xì)胞的新型治療方案有重要意義。