自動組織脫水機的應(yīng)用體會

【摘要】 目的：闡述應(yīng)用自動組織脫水機處理標(biāo)本比手工處理標(biāo)本切片質(zhì)量顯著提高。方法：設(shè)定專用程序應(yīng)用自動組織脫水機處理標(biāo)本。結(jié)果：標(biāo)本處理適當(dāng)，組織切片更薄，厚薄均勻，染色結(jié)果更清晰。結(jié)論：切片質(zhì)量顯著提高，故應(yīng)用自動組織脫水機處理優(yōu)于手工處理。

【關(guān)鍵詞】 自動組織脫水機；標(biāo)本；手工


　　隨著現(xiàn)代病理技術(shù)的發(fā)展，對病理切片的質(zhì)量要求越來越高。傳統(tǒng)的手工組織處理由于費時、費力，且對組織的脫水不夠而造成切片質(zhì)量差，以及許多意外因素不能充分保證脫水的正常進(jìn)行而逐漸被自動脫水機所取代。我院自2004年至今使用ShandonExcwlsior自動組織脫水機，標(biāo)本的處理效果明顯改觀，切片質(zhì)量顯著提高，現(xiàn)介紹如下。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 Shandon Excwlsior自動組織脫水機，附塑料脫水籃一只可容222個包埋盒，塑料包埋盒。

　　1.2 試劑 15%中性甲醛固定液、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、乙醇、二甲苯、石蠟(熔點62℃～65℃)。

　　1.3 處理過程 組織取材時，將小標(biāo)本(如內(nèi)窺鏡及穿刺組織、較小活檢組織)用擦鏡紙包好，大標(biāo)本取材2 cm×1 cm×0.3 cm，置于寫有檢驗號碼的塑料包埋盒內(nèi)，放入組織籃，將組織籃置于反應(yīng)室，關(guān)閉透明蓋并鎖上，即按所需程序開始進(jìn)行組織處理，處理過程約為12 h左右。其后經(jīng)過，補充固定：15%中性甲醛兩道，各1 h,溫度為35℃，設(shè)置加壓、攪拌；梯度酒精脫水：75%乙醇室溫1 h,85%乙醇室溫1 h,95%乙醇兩道室溫各1 h,乙醇兩道室溫各50 min。末道乙醇設(shè)置加壓、攪拌；透明：三道二甲苯室溫各30 min，每道均設(shè)置加壓、攪拌；浸蠟：1、2兩道石蠟各40 min，第3道石蠟1 h,溫度均為62℃，末道設(shè)置真空、加壓、攪拌。

　　2 結(jié)果標(biāo)本處理適當(dāng)，組織切片更薄，可達(dá)2 μm～3 μm，柔軟、厚薄均勻。對較硬的組織如：宮頸、皮膚等及某些難切組織如脂肪瘤等，也能切出完整切片。染色結(jié)果更清晰(尤其是細(xì)胞核的染色)，避免了因組織處理不當(dāng)造成的胞核發(fā)灰現(xiàn)象。

　　圖1 手工脫水處理：乳腺纖維腺瘤，組織較硬，脫水稍不透，示切片較完整，組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)較清晰HE×250（略）

　　圖2 機器脫水處理：乳腺纖維腺瘤，組織處理適當(dāng)，示切片完整，組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)清晰HE×250（略）

　　3 討論

　　3.1 全自動組織脫水機的優(yōu)越性

　　3.1.1 容量大 一次可處理200多個組織塊，可以滿足大多數(shù)醫(yī)院的需求。

　　3.1.2 全封閉、自動抽真空、自動加溫 使工作室呈負(fù)壓，使組織與各個液體的交換更加完全，從而利于組織脫水、透明及浸蠟。以往脫水機對皮膚、脂肪等組織脫水往往不夠，造成切片不完整、破碎，而對于細(xì)胞豐富的組織，如淋巴結(jié)等，使用Shandon全自動組織脫水機后，再配以鋒利的刀片則可以切出1 μm～2 μm厚度的切片，不但可以滿足對切片質(zhì)量控制的要求，還有利于診斷醫(yī)師對疾病的診斷。

3.1.3 安全性好 以往的脫水機在程序轉(zhuǎn)換時，是機器帶動組織標(biāo)本移位。當(dāng)遇到某些意外原因(如停電)時，會導(dǎo)致標(biāo)本懸掛，離開液面暴露在空氣中，尤其是運行到高濃度酒精及二甲苯這些環(huán)節(jié)時，將使標(biāo)本干枯、變形以至硬脆。不僅給制片帶來困難，而且使診斷難度加大，甚至無法診斷，而該機運行方式是組織標(biāo)本不動，試劑靠真空泵進(jìn)行泵進(jìn)泵出依次運轉(zhuǎn)，當(dāng)遇突發(fā)事件而使程序不能繼續(xù)運行時，該機將使該試劑保留于工作室內(nèi)，避免組織受損，降低醫(yī)療糾紛的發(fā)生率。

　　3.1.4 環(huán)保性好 一般脫水機由于其密封性差，試劑易于揮發(fā)，尤其是二甲苯彌散在空氣中，對工作人員的身體損害非常大，而該機由于采用全封閉設(shè)計，且具有異味自動抽吸功能，大限度的防止了試劑的揮發(fā)，不但保證了試劑的純度，而且還避免了科室的空氣污染。

　　3.1.5 操作方便、節(jié)約試劑 該機具有脫水、試劑輪換同步進(jìn)行功能，從而避免了人工更換和再灌注試劑的麻煩，既節(jié)省時間，又保障了工作人員的健康與安全，同時，Shandon全自動脫水機具有酒精的比重自動監(jiān)測功能，通過測量缸酒精的比重，可以檢測這一缸陳舊酒精的水含量，這種方法不但能保證脫水質(zhì)量，而且還能延長試劑壽命，節(jié)省試劑，更有利于切片質(zhì)量控制。

　　3.2 體會 在試劑方面，道程序用15%甲醛對標(biāo)本進(jìn)行再次固定，使標(biāo)本的固定效果更好，更有利于以后的脫水、透明和浸蠟。酒精脫水的初級濃度為75%，而后依次增高。使組織中的水分依次被置換出來。不至于因酒精的濃度過低或過高而使脫水不。透明劑仍選用二甲苯，因其與脫水劑和石蠟兼容性好，對組織染色影響較小。在脫水過程中，為防止從缸向后面一步步帶試劑問題，我們采用每一種試劑后一步都加壓、攪拌，組織在反應(yīng)室內(nèi)呈現(xiàn)一種負(fù)壓狀態(tài)，使反應(yīng)室內(nèi)的試劑全部排凈，而達(dá)到試劑延長使用的目的。為保證標(biāo)本固定充分，故在15%甲醛固定液中均加溫度35℃處理組織，因在加溫固定液中能使組織硬度增加，便于制片，使細(xì)胞半液體(膠體)變?yōu)榘牍腆w狀(凝膠)對組織有固化作用。在三道二甲苯透明過程中，為了保證透明浸蠟的充分，在此過程中均使用加壓、攪拌，但必須注意三道二甲苯各設(shè)置30 min，即可達(dá)到透明效果，不宜過長，使組織變脆。在組織浸蠟的3缸石蠟中溫度不可過高，以60℃～65℃為佳。我院使用Shandon全自動組織脫水機后，在工作中不斷學(xué)習(xí)、摸索，在制片過程中強調(diào)各個環(huán)節(jié)注重每個細(xì)節(jié)，使標(biāo)本的處理效果明顯改觀，切片質(zhì)量顯著提高，給常規(guī)工作也帶來了方便。

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