【關(guān)鍵詞】 變形紅細胞
[摘 要] 目的:在實驗室用普通光學(xué)顯微鏡取代相差顯微鏡,檢測尿中紅細胞形態(tài)改變對兒童血尿來源診斷具有實際意義。方法:留取晨尿50 ml混勻,取10 ml倒入刻度管內(nèi)。1 500 r/min,5 min棄上清留0.2 ml。滴在載玻片上。18 mm×18 mm蓋玻片壓住。10×40的鏡頭檢查。結(jié)果:表明有2種以上形態(tài)變化的紅細胞占尿紅細胞80%以上即可診斷為腎小球性血尿。20%~80%之間為混合型血尿。20%以下為非腎性血尿。結(jié)論:用普通光學(xué)顯微鏡替代相差顯微鏡檢查尿中紅細胞形態(tài)鑒別其來源。方法和操作準確簡便易行。
[關(guān)鍵詞] 兒童;普通光學(xué)顯微鏡;相差顯微鏡;變形紅細胞
Child Hematuria Ordinary Light Mirror Examines Its Shape Change the Significance
Abstract:ob[x]jective In the laboratory with the ordinary light microscope substitution phase contrast microscope,in the examination urine the red blood cell shape change originates the diagnosis to the child hematuria to have the practical significance. Methods Is it fetch urine 50 ml mix even to fetch 10 ml pour scale into in the test tube fresh morning to leave.1 500 r/min.5 min abandons and leavesclearly 0.2 ml.Drip on glass slice of year.18 mm×18 mm is covered the glass slice and pushed down.10×40 lenses are checked.Results Is it have 2 more than red blood corpuscles that shape change account for urine 80% more than red blood corpuscles namely diagnosable for kidney little ball blood in the urine to indicate.For the mixing type blood in the urine between 20%~80%.20% of the the following is not the kidney blood in the urine.
Conclusion Is it differ by with ordinary and operating a ccuratel optics microscope microscope check urine red blood corpuscles shape distinguish his source to substitute.Method y and simply and easily to do.
Key words:Children;Ordinary optics microscope;Phase contrast microscope;Distortion red blood cell
血尿是兒童泌尿系統(tǒng)疾病中常見的癥狀,臨床對原因不明的無癥狀血尿的鑒別較為困難。目前實驗室對血尿的鑒別方法較多,被的方法大致有電鏡掃描法、尿中紅細胞染色法、相差顯微鏡法和血細胞分析儀測定尿中紅細胞體積及分布曲線法。1979年國外首先應(yīng)用相位差顯微鏡檢查尿中紅細胞形態(tài)。發(fā)現(xiàn)腎小球性血尿紅細胞的形態(tài)多樣和大小不等,而非腎小球性血尿多為形態(tài)和大小正常的紅細胞,兩者明顯不同。經(jīng)過國內(nèi)外臨床實驗觀察均肯定了它的診斷價值。但是所用的儀器和設(shè)備難以普及應(yīng)用。我們采用普通光鏡檢測兒童尿中紅細胞形態(tài)學(xué)特點鑒別其來源。設(shè)備和操作都簡便易行,適合于一般實驗室應(yīng)用。現(xiàn)將我們的研究結(jié)果報告如下。
1 材料與方法
留取早晨新鮮尿50 ml,混勻后取10 ml倒入刻度離心管內(nèi),1 500 r/min離心5 min。待離心停止后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2 ml沉淀,輕搖離心管,使尿沉淀有形成分充分混勻。取尿沉淀0.2 ml,滴到載玻片上,用18 mm×18 mm的蓋玻片覆蓋。用10×40倍的鏡頭,觀察10個視野的紅細胞,從所見低值和高值計算平均每個視野的紅細胞數(shù),如果超過10個/HP,則進行紅細胞形態(tài)分類。
2 血尿紅細胞形態(tài)和數(shù)量診斷標準
2.1 血尿紅細胞形態(tài)診斷標準 正常紅細胞:紅細胞大小、形態(tài)正常,或呈球形、鋸齒形,可伴有少數(shù)紅細胞影。變形紅細胞:紅細胞大小不等,形態(tài)多樣,多伴有不同程度的血紅蛋白丟失。胞漿形成單個或數(shù)個芽胞狀致密物,向細胞外突出。沿紅細胞內(nèi)側(cè)有顆粒狀或線狀致密物。面包圈樣、靶樣、三角樣、土豆形、腎形等。大紅細胞,破裂紅細胞,殘留多少不等的胞漿或散在形態(tài)和大小不一、多少不等、濃淡不勻的致密物。紅細胞碎片可形態(tài)多樣,胞漿或濃或淡,有的呈致密的小塊。
2.2 血尿紅細胞的數(shù)量診斷標準 有形態(tài)變化的紅細胞占血尿紅細胞的80%以上。變形紅細胞種類在2種以上。
3 結(jié)果
我們選擇了134例病人,除了具有典型的臨床表現(xiàn)外,還進行了較詳細的實驗室檢查或經(jīng)X線腹部平片、靜脈或逆行腎盂造影、CT或B超、膀胱鏡、手術(shù)等證實診斷。共有腎小球腎炎64例,非腎小球腎炎70例,其中尿路感染31例,多囊腎3例,腎尿路腫瘤4例,腎盂腎炎18例,尿結(jié)石14例。經(jīng)檢查腎小球腎炎尿變形紅細胞種類2種以上,變形紅細胞數(shù)量占血尿紅細胞數(shù)量80%以上者占95.1%,20%~80%的占4.9%,沒有一例小于20%,而非腎小球腎炎疾病中變形紅細胞的種類和所占的數(shù)量在兩種以下和小于20%的占絕大多數(shù)。尿路感染占96.7%,多囊腎占,腎尿路腫瘤占,腎盂腎炎占91%,尿結(jié)石占92.9%。
研究結(jié)果表明有2種以上形態(tài)變化的紅細胞占尿紅細胞80%以上即可診斷為腎小球性血尿。紅細胞形態(tài)2種以下,總數(shù)占尿紅細胞80%以下者,即提示非腎小球性血尿。
注意事項:有些紅細胞在腎臟長期滯留,受機械作用破壞或在血管內(nèi)破壞形成血紅蛋白尿,不能檢出。規(guī)范化尿沉渣操作較為繁瑣,要按步驟做。除檢驗人員訓(xùn)練有素,工作認真負責(zé),還需對所有實驗器材(標本收集器皿、離心機)進行標準化。
4 討論
血尿是腎臟疾病的一種常見臨床癥狀,它是血液經(jīng)損傷的腎小球,腎小管或尿路混入尿液的。由于血量不同,分為鏡下血尿和肉眼血尿。正常兒童尿液中無紅細胞或有微量紅細胞。尿液常規(guī)檢查,每一高倍視野應(yīng)少于3個紅細胞。12 h尿細胞計數(shù)紅細胞數(shù)量應(yīng)少于50萬個或每毫升尿液中紅細胞應(yīng)少于8 000個。在劇烈運動后,尿中可能出現(xiàn)一時性的紅細胞輕度增多,也可認為是正常。但如果尿中經(jīng)常出現(xiàn)紅細胞或尿沉渣鏡檢每一高倍視野紅細胞大于3個,12 h尿紅細胞計數(shù)大于50萬個,則稱為血尿。血尿是一種復(fù)雜的病理過程。要明確血尿的性質(zhì)需要特殊的檢測手段并有一定的難度。尤其是兒科病人無癥狀全程血尿的臨床診斷,往往要借助于腎穿等檢查,給病人帶來一定的痛苦。早有人使用染色法,計數(shù)每毫升尿中畸形紅細胞數(shù),來鑒別腎性與非腎性血尿。但此法大的不足是判斷標準不易掌握,主觀因素多,人為誤差較大。特別是尿中含少量紅細胞時準確性差。1979年Birch和Fairley等首先使用相差顯微鏡觀察尿中紅細胞形態(tài)變化來鑒別腎性與非腎性血尿,認為較好的提高了臨床的診斷率。但儀器昂貴難以普及。
用普通光學(xué)顯微鏡檢查尿紅細胞形態(tài)學(xué)特點是判斷血尿來源的有價值的檢驗方法,可以鑒別腎小球性和非腎小球性血尿。對于無癥狀的血尿可以縮小鑒別診斷的范圍,有利于確定檢查方向和選擇適宜的檢查方法。腎小球性血尿不需要做膀胱鏡、腎盂造影、腎血管造影、腎掃描或CT檢查。只需進行腎小球疾病的有關(guān)檢查。只有非腎小球性血尿時,才適當(dāng)?shù)剡x擇上述或其他檢查方法。不僅可以減少病人的痛苦和經(jīng)濟負擔(dān),也可減少人力和物力的浪費。紅細胞變形的機制還不是完全清楚。除紅細胞本身病理因素改變以外,不同pH和滲透壓的變化,也可導(dǎo)致紅細胞形態(tài)的改變。研究發(fā)現(xiàn):堿性(pH>9.0)尿中,紅細胞膜脂質(zhì)外層表面增加。出現(xiàn)鋸齒形紅細胞和棘形紅細胞。酸性(pH<5.0)尿中,紅細胞脂質(zhì)內(nèi)層表面增加,出現(xiàn)可逆型紅細胞或細胞溶解,破壞。滲透壓較低(<400 mmol/L)時,出現(xiàn)面包圈樣,戒形紅細胞且易溶血。滲透壓較高時(>900 mmol/L)且pH增加時,則形成鋸齒形和棘形紅細胞。而非腎小球性血尿主要是腎小球以下部位和泌尿通路上毛細血管破裂出血,不存在通過腎小球濾膜造成的擠壓損傷,因而紅細胞形態(tài)正常。來自腎小管的紅細胞雖經(jīng)pH及滲透壓的變化作用。但因時間短暫,變化輕微,故呈均一紅細胞血尿。除以上原因外,尿中溶質(zhì)的張力也可影響尿中紅細胞的形態(tài)。體外試驗表明尿溶液滲透壓不變,但氯化鈉含量增高時,紅細胞形態(tài)可趨于正常。腎小管功能也可影響紅細胞形態(tài)。關(guān)鍵部位是腎小管袢升支粗段的低滲區(qū),如果低滲區(qū)受到損害或腎小管功能缺陷時,將影響尿紅細胞形態(tài)。高血壓和運動也明顯影響患者的血流動力學(xué)。增加腎流量及壓力。導(dǎo)致由腎小球逸出的紅細胞數(shù)目明顯增多。尿路感染時,尿液中變形紅細胞形成的幾率增加。其可能是由于尿液pH值的改變導(dǎo)致紅細胞變形。腎小管間質(zhì)損傷,正常的滲透壓梯度不能形成。此時所產(chǎn)生的尿紅細胞形態(tài)不至于變形呈現(xiàn)均一的形態(tài)。用普通光學(xué)顯微鏡檢測尿中紅細胞形態(tài)學(xué)特點。設(shè)備簡單易行,可以做到早期快速。是一種非創(chuàng)傷性檢查,為臨床鑒定血尿的來源提供了可靠的診斷。
參考文獻:
?。?] 李驚子,堪貽璞,畢增祺,等.應(yīng)用相差顯微鏡鑒別血尿的來源[J].中華內(nèi)科雜志,1984,23:688.
[2] 李幼姬,葉任高.紅細胞活體染色后用光學(xué)顯微鏡鑒別血尿的來源的新方法[J].中華腎臟病雜志,1985,1(2):7476.
[3] Chu YD,Kitamoto Y,et al.Differentiation of hematuria by differentiat interference microscopy with asimple criterion[J].Kumamoto med J.1990,42:63.
?。?] 董秀清,孫玉玲.用一種獨特的紅細胞鑒別血尿[J].中華腎臟病雜志,1999,15(5):311313.
?。?] 陳茂杰.芽孢狀紅細胞鑒別血尿來源的臨床意義[J].中華臨床醫(yī)學(xué)實踐雜志,2002,1(1):73.