甲狀腺乳頭狀癌組織中VEGF-C及VEGFR3的表達(dá)及意義

作者：高恒宇 馬文平 王建堃 張雅芳

作者單位：哈爾濱醫(yī)科大學(xué)解剖教研室

【摘要】  　　目的 觀察VEGF-C和VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)，研究二者表達(dá)的相關(guān)性，探討甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞淋巴管轉(zhuǎn)移機(jī)理。方法 用免疫組化方法檢測(cè)VEGF-C和VEGFR3在人甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺腺瘤中的表達(dá)情況，并進(jìn)行比較和分析。結(jié)果 在甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺腺瘤組織中均見(jiàn)到VEGF-C和VEGFR3陽(yáng)性表達(dá)，但在甲狀腺乳頭狀癌組織VEGF-C和VEGFR3的表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度均高于甲狀腺腺瘤，且VEGF-C和VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論 VEGF-C和VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞中高表達(dá)，并且可能與此腫瘤的淋巴管轉(zhuǎn)移相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】  甲狀腺乳頭狀癌 VEGF-C VEGFR3 免疫組化

　　The ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and its significance

　　GAO Heng-yu，et al.

　　(Department of Anatomy, Harbin Medical University, Harbin 150086 China)
   
　　【Abstract】  ob[x]jective  To observe the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and lymphoducts of Papillary Thyroid Carcinoma and to study its correlation,in order to elucidate the mechanism of lymphatic me[x]tastasis of cancer cell.   Methods  To examine the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and Thyroid adenimas by immunohistochemical staining, and for comparison and analysis. Results  Both VEGF-C and VEGFR3 expressed in Papillary Thyroid Carcinoma and Thyroid adenimas.The rate and intension of VEGF-C and VEGFR3 proteins ex[x]pression were higher in Papillary Thyroid Carcinoma than in Thyroid adenimas,and the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma expressed positive correlation. Conclusions  The VEGFR3 and VEGF-C in cancer cells of papillary thyroid carcinoma have high intensive ex[x]pression and have positive correlations with the cancer me[x]tastasis.
   
　　【Key words】  Papillary thyroid carcinoma  VEGF-C  VEGFR3  Immunohistochemistry
   
　　甲狀腺癌是常見(jiàn)的腫瘤之一,在全球范圍內(nèi)有很高的發(fā)病率和致死率。我國(guó)年發(fā)病率為0.5～40.0人/10萬(wàn)人，女性患者較多，對(duì)人類(lèi)的健康危害很大。甲狀腺乳頭狀癌的轉(zhuǎn)移方式多為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，但是對(duì)于甲狀腺乳頭狀癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制尚不十分清楚。本研究旨在通過(guò)觀察VEGF-C和VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)情況探討甲狀腺乳頭狀癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制，為甲狀腺乳頭狀癌轉(zhuǎn)移提供生物學(xué)依據(jù)，為甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷及判斷預(yù)后提供參考。

　　1  材料與方法

　　1.1  實(shí)驗(yàn)材料  取24例病理活檢證實(shí)為甲狀腺乳頭狀癌癌組織，16例甲狀腺腺瘤組織，由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院和附屬第二醫(yī)院病理科提供。兔抗人VEGF-C 多克隆抗體、兔抗人VEGFR3多克隆抗體、PV9000 兩步法免疫組化試劑盒（均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司）。

　　1.2  實(shí)驗(yàn)方法  將甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本和甲狀腺腺瘤分別取材，經(jīng)4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，石蠟切片機(jī)連續(xù)切片，片厚4μm,分別進(jìn)行VEGF-C 和VEGFR3的兩步法免疫組化染色，蘇木素復(fù)染，光學(xué)顯微鏡觀察，計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)分析。

　　2  結(jié)果

　　2.1  VEGF-C 及VEGFR3在甲狀腺腺瘤組織及甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)情況

　　2.1.1  甲狀腺腺瘤組織中VEGF-C及VEGFR3的表達(dá)  在甲狀腺腺瘤組織中，VEGF-C 在3例樣本中呈陽(yáng)性表達(dá)，表達(dá)于甲狀腺腺細(xì)胞胞漿，陽(yáng)性率為18.8%（3/16），淋巴管無(wú)表達(dá)(圖1見(jiàn)封四)。VEGFR3 在甲狀腺腺瘤細(xì)胞未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)，在甲狀腺腺細(xì)胞間可見(jiàn)在血管內(nèi)皮細(xì)胞上呈弱陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率為25%（4/16）(圖2見(jiàn)封四)。

　　2.1.2  甲狀腺乳頭狀癌中VEGF-C 及VEGFR3的表達(dá)  在甲狀腺乳頭狀癌組織中，VEGF-C 在甲狀腺乳頭狀癌癌細(xì)胞胞漿中表達(dá)（圖3見(jiàn)封四），分布均勻，陽(yáng)性率為83.3%（20/24）；VEGFR3 主要在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞間的血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)，可見(jiàn)血管壁上呈棕黃色顆粒的陽(yáng)性表達(dá)(圖4見(jiàn)封四)，陽(yáng)性率為91.7%（22/24）。兩者進(jìn)行相關(guān)分析，r=0.5618，P<0.01,呈正相關(guān)。
 
　　2.2  VEGF-C 及VEGFR3 表達(dá)情況的的比較,詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

　　表1  甲狀腺腺瘤與甲狀腺乳頭狀癌VEGF-C和VEGFR3表達(dá)的比較（略）

　　注：其中1與2、3與4比較，P<0.05，有顯著差異。
 
　　3  討論

　　3.1  VEGF-C（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子相關(guān)蛋白）是一種特異性使淋巴管增生的細(xì)胞因子，又名淋巴管生成因子。它是VEGF家族的成員之一，其與相應(yīng)的受體VEGFR3結(jié)合，可導(dǎo)致淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)淋巴管的增生，從而促進(jìn)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。因此，它的高表達(dá)被認(rèn)為與腫瘤細(xì)胞的區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
   
　　目前研究發(fā)現(xiàn)，VEGF-C在許多惡性腫瘤中高表達(dá)，與腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)密切相關(guān)，如胃癌、肺癌、乳腺癌、大腸癌、前列腺癌等。Amioka等［1］曾經(jīng)報(bào)道，VEGF-C在胃癌中表達(dá)陽(yáng)性，而且其表達(dá)程度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管浸潤(rùn)及預(yù)后有關(guān)。李曉明等［2］研究78例非小細(xì)胞肺癌組織發(fā)現(xiàn)，VEGF-C在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織中的表達(dá)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。Skobe等［3］在研究人乳腺癌細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)，VEGF-C可誘導(dǎo)乳腺癌中淋巴管生成，并可促進(jìn)乳腺癌的腫瘤細(xì)胞向區(qū)域淋巴結(jié)和肺進(jìn)行轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。Furudoi等［4］研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)腸癌中，VEGF-C表達(dá)陽(yáng)性率很高，還與淋巴管生成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Tsurusaki等［5］發(fā)現(xiàn)，在前列腺癌中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性組的VEGF-C表達(dá)水平明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組，并且VEGF-C表達(dá)陽(yáng)性者淋巴管的數(shù)量明顯增多。
   
　　本實(shí)驗(yàn)中，VEGF-C在甲狀腺腺瘤中表達(dá)陽(yáng)性率為18.8%，在甲狀腺乳頭狀癌中表達(dá)陽(yáng)性率為83.3%，二者比較P<0.05，有顯著差異； VEGFR3在甲狀腺腺瘤中的表達(dá)為25%、甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)為91.7%，二者比較P<0.05，有顯著差異；且VEGF-C和VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌中均為高表達(dá)，這意味著有大量淋巴管生成，這為癌細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移提供了可能。

　　3.2  VEGF-C如果與受體VEGFR2結(jié)合則促進(jìn)微血管生成，而如果與受體VEGFR3結(jié)合則促進(jìn)淋巴管的生成，通過(guò)對(duì)比VEGF-C與VEGFR3在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)情況，我們發(fā)現(xiàn)，VEGF-C與VEGFR3的表達(dá)呈正相關(guān)，說(shuō)明了VEGF-C主要是與VEGFR3結(jié)合，從而促進(jìn)了淋巴管的生成，使甲狀腺乳頭狀癌的淋巴轉(zhuǎn)移的機(jī)率增加，這與甲狀腺乳頭狀癌在臨床上易出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相符，臨床可根據(jù)患者病變組織的VEGF-C及VEGFR3表達(dá)情況判斷預(yù)后，具體方法和標(biāo)準(zhǔn)還需進(jìn)一步探索。

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