液基薄層細(xì)胞處理技術(shù)誕生于1991年美國等國家,率先應(yīng)用于婦科細(xì)胞學(xué)檢查,國內(nèi)從2001年開始作液基細(xì)胞學(xué)篩查宮頸癌的研究,使該項技術(shù)得到迅速發(fā)展,被稱之為一場細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)的革命,它從根本上解決了常規(guī)脫落細(xì)胞制片假陰性率高(15%-20%)、丟失細(xì)胞率高(80%)和涂片質(zhì)量差等技術(shù)難題,使宮頸癌的陽性檢出率達(dá)95%以上,為脫落細(xì)胞學(xué)診斷作出了重大貢獻(xiàn)。但是過去該技術(shù)需要國外的制片機(jī)、細(xì)胞保存液等,它的價格昂貴,在國內(nèi)也只能是一些大醫(yī)院才能開展該項目,在基層醫(yī)院的推廣則比較緩慢。為此,我們聯(lián)合國內(nèi)的有關(guān)廠家合作研發(fā)了半自動的離心法制片機(jī),并自主研發(fā)了細(xì)胞保存液,大大地降低了液基薄層細(xì)胞的制片成本,從而使該項技術(shù)易于被廣大基層醫(yī)院所接受且進(jìn)行推廣使用。目前,它已成為篩查宮頸癌好的方法之一,為宮頸癌的早期診斷和治療提供了非常明確的診斷依據(jù),是一項非常值得推廣應(yīng)用的臨床操作技術(shù)。
一、工作原理:利用細(xì)胞保存液中特有的成分和振蕩器使采集的細(xì)胞分散,游離在細(xì)胞保存液中,形成細(xì)胞懸液,并分解、消化采集物中的粘液、紅細(xì)胞等雜質(zhì),再通過膜過濾技術(shù)或重力分離技術(shù),將混合液(細(xì)胞保存液)中未分解的粘液和雜質(zhì)去除,得出比較純的細(xì)胞成分,再通過離心法制片機(jī)將細(xì)胞保存液中的細(xì)胞均勻轉(zhuǎn)移到玻片上,形成一個液基細(xì)胞薄片,經(jīng)染色后,制備的細(xì)胞涂片背景干凈、細(xì)胞分布均勻、清晰,細(xì)胞陽性檢出率高,有利于細(xì)胞學(xué)醫(yī)生的診斷。
操作步驟(1) 樣本采集(應(yīng)用細(xì)胞刷采集細(xì)胞,應(yīng)不少于50000個用于診斷的細(xì)胞)。
(2) 細(xì)胞保存液(有效期二年,細(xì)胞保存15天以上,能夠清洗細(xì)胞,保持細(xì)胞完整性,去除消化粘液等雜質(zhì))。
(3) 振蕩分離(使粘在一起的細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分離、分散,形成細(xì)胞懸液)。
(4) 比重離心(比重不同,保存液中的成分懸浮度不同,去除上清液及粘液絲)。
(5) 制片(除去上清液,將沉淀有細(xì)胞的玻片取出,觀察玻片表面應(yīng)有一均勻的薄層涂片)。
(6) 干片及染色。
(7) 觀察效果及診斷(細(xì)胞均勻地單層分布、背景清潔、細(xì)胞槳、核清晰可見,著色好,易于診斷)
三、應(yīng)用范圍
(1) 宮頸脫落細(xì)胞檢測。(2)胸腹水細(xì)胞檢測。(3)痰液細(xì)胞檢測
(4)尿液細(xì)胞檢測。(5)穿刺細(xì)胞檢測。
四、與傳統(tǒng)制片方法的比較