兩種TP抗體檢測試劑的質(zhì)量評價

　   梅毒螺旋體(treponemapallidum，TP)特異性抗體與非特異性抗體均是衛(wèi)生醫(yī)療機構(gòu)及采供血機構(gòu)的常規(guī)檢測項目之一，也是保證輸血安全的必測指標，其檢測方法的選擇尤其重要。由于不同廠家檢測試劑的抗原純度、來源及濃度等因素導(dǎo)致測定結(jié)果的良莠不齊，因此國家衛(wèi)生部要求采用兩種不同廠家的試劑平行檢測以盡可能降低輸血風(fēng)險。為了大程度減少假陰性血液樣本的漏檢，不同廠家檢測試劑的優(yōu)組合是TP抗體檢測工作的關(guān)鍵。故本中心采用兩種TP抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)診斷試劑和甲苯胺紅試驗(TRUST)試劑同時篩查4608份無償獻血者標本，并采用TP明膠凝集試驗(TPPA)進行驗證，現(xiàn)報道如下。

　　1　資料與方法

　　1.1　一般資料　

2011年5月至2011年6月來本中心參加無償獻血的獻血者，共計4608例。

　　1.2　試劑與儀器　

         試劑：TP抗體ELISA診斷試劑盒(珠海麗珠)為A試劑，TP抗體ELISA診斷試劑盒(ICESyphilis，Mur-ex)為B試劑，TRUST試劑，為C試劑。所有試劑均為合格試劑，并在有效期內(nèi)嚴格按照試劑使用說明書要求操作。儀器：主要儀器為兩臺深圳市愛康電子有限公司全自動加樣系統(tǒng)Xantus-200，以及4臺瑞士Hamilton公司全自動酶免處理系統(tǒng)MicrolabFAME24/20。

　　1.3　方法　

         采用A、B、C3種試劑分別檢測4608份無償獻血標本，均嚴格按本中心實驗室相關(guān)SOP操作，其中39例有陽性結(jié)果，送往深圳市慢性病防治中心采用TPPA進行驗證。計算各種試劑單獨檢測和兩兩聯(lián)合檢測結(jié)果的假陰性率(假陰性率=陰性例數(shù)/確證陽性例數(shù))。

　　1.4　統(tǒng)計學(xué)處理　

         采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料以率表示，采用χ 2檢驗，以p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

　　2　結(jié)　　果

　　2.1　各種試劑檢測結(jié)果分析　

         A試劑檢測結(jié)果：陽性34例，陰性5例;B試劑檢測結(jié)果：陽性32例，陰性7例;C試劑檢測結(jié)果：陽性22例，陰性17例。TPPA驗證結(jié)果：性24例，陰性15例。

　　2.2　各種試劑單獨檢測假陰性率分析　

         A試劑假陰性率為20.83%，B試劑假陰性率為27.17%，C試劑假陰性率為70.83%。

　　2.3　各種試劑兩兩聯(lián)合檢測假陰性率分析　
         A和B試劑聯(lián)合檢測假陰性率為9.09%，A和C試劑聯(lián)合檢測假陰性率為16.67%，B和C試劑聯(lián)合檢測假陰性率為25.00%。

　　3　討　　論

         梅毒是由TP感染引起的一種性傳播疾病。人體在感染了TP之后會產(chǎn)生特異性TP抗體(主要有IgM和IgG)及非特異抗體(又稱反應(yīng)素，是由螺旋體自身的類脂和脂蛋白，以及破壞組織細胞所釋放脂樣物質(zhì)刺激機體所產(chǎn)生的IgM和IgG)。TP特異抗體的特點為出現(xiàn)早，而消失遲，所以即使經(jīng)過了抗梅毒治療，還能檢測到特異的TP抗體，有些患者會終生檢出[1]。TRUST檢驗方法是以類脂質(zhì)作為抗原，檢測血清中的反應(yīng)素，但是容易受很多因素影響[2]，如患有某些急性傳染病或自身免疫性疾病(水痘、風(fēng)疹、上呼吸道感染、病毒性肝炎、肺炎、肺結(jié)核、亞急性的細菌性心內(nèi)膜炎)，TRUST檢測也可以出現(xiàn)陽性[3]。TP-ELISA法是利用基因重組TP的特異性抗原(TpN15、TpNl7和TpN47)包被酶標板孔，采用雙抗原夾心法檢測TP特異性IgM和IgG抗體，此方法可應(yīng)用于自動化檢測系統(tǒng)，可以進行大批量的檢測，是目前篩查檢測梅毒的一種好方法[4-5]。
         本研究中，各種試劑單獨檢測假陰性率分析：A試劑假陰性率為20.83%，B試劑假陰性率為27.17%，C試劑假陰性率為70.83%。各種試劑兩兩聯(lián)合檢測假陰性率分析：A和B試劑聯(lián)合檢測假陰性率為9.09%，A和C試劑聯(lián)合檢測假陰性率為16.67%，B和C試劑聯(lián)合檢測假陰性率為25.00%。由此可推測，選擇佳的檢測試劑組合進行無償獻血者抗-TP篩查，可以減少假陰性率，進一步降低輸血風(fēng)險，保證輸血安全。另外，作者通過本次研究發(fā)現(xiàn)B試劑單一使用假陰性率高于A試劑，其原因可能為A試劑這種國產(chǎn)試劑質(zhì)量目前已與進口試劑相當(dāng)，也可能是兩種試劑的重組抗原組分不一致導(dǎo)致。

　　參考文獻

　　[1]程艷杰，王廣杰，王旭，等.梅毒螺旋體血清學(xué)檢測方法的實驗室評價[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(3)：272.
 

　　[2]葉順章.性傳播疾病的實驗室診斷[M].2版.北京：科學(xué)出版社， · 0 3 9 · 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志2014年4月第35卷第7期　IntJLabMed，April2014，Vol.35，No.72009，35-55.
 

　　[3]吳文輝.不同方法檢驗梅毒的結(jié)果比較分析[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2011，18(1)：81-85.
 

　　[4]徐龍珍，畢永春.不同梅毒血清學(xué)檢測方法的聯(lián)合應(yīng)用評價[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)，2009，24(3)：111-112.
 

　　[5]李宇飛，郭步平.三種梅毒酶聯(lián)免疫診斷試劑的臨床應(yīng)用性[J].長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，22(2)：133-135.
 

　　(收稿日期：2013-10-18)